研究課題
azoxymethane (AOM)関連発癌に対するMSCのchemoprevention作用は，新しい2つの機序すなわち，①O6メチルグアニン（O6MeG）付加体を減らすこと，②acute apoptotic response of genotoxic carcinogen （AARGC）を免れた細胞をG1期停止やアポトーシスに導くこと，によりイニシエーションを解除した．AOM/DSS炎症発がんモデルでは，MSCは腫瘍数を減らすが，腫瘍サイズに影響を与えなかった．ACF形成モデルでは，MSCはACF形成を抑制した．以上より，MSCは発がんのイニシエーションを複数の作用点から早期に抑制した．齧歯類では，AOM暴露後８時間に大腸上皮細胞がAARGCに陥る．これは変異負荷を解消するために，生体に本来備わる発がん予防機構である．MSCがメチルグアニンメチル基転移酵素（MGMT）を活性化させ，O6MeGを減じた結果，見かけ上AARGCが抑制された．ラット腸上皮細胞株IEC-6とMSCの共培養により，O6メチルグアニンの程度に応じて，MSCはIEC-6の増殖を抑制し，G1 arrestやアポトーシスを誘導した．この細胞増殖抑制作用は，TGF-betaを介したパラクライン作用であった．能動的なCpGアイランドの脱メチル化には，いくつかの酵素が関与するが, 最終年度は，activation-induced deaminase (AID), ten-eleven translocation (TET) に注目した．TET1-3に関しては，合成siRNAによる一過性のKD株を樹立した．次にTET単独あるいはAID（KD安定株）との組み合わせによるダブルKD（DKD)，トリプルKD（TKD）およびクアドラKD（QKD）を樹立した．MGMTプロモータにおけるDNAメチル化レベルをpyrosequencerにより定量的に解析した．残念なことにTET/AIDがこの系においてMGMT発現とは無関係であることが判明した．
すべて 2016 2015
すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 2件)
PLoS ONE
巻: 11 ページ: e0149327
10.1371/journal.pone.0149327
Medical Science Digest
巻: 2 ページ: 65-68
巻: 10 ページ: e0137801
10.1371/journal.pone.0137801
