海洋生物を創薬ソースとしたＣ型慢性肝炎治療薬候補化合物の探索

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25460985
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 山下 篤哉 山梨大学, 総合研究部, 助教 (00334871)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 抗ウイルス剤

研究実績の概要

本研究より同定したHCV NS3ヘリカーゼ抑制活性を持つ海洋生物由来の幾つかの化合物は、ヒドロキシアントラキノン構造を持つことからHCV NS3ヘリカーゼ抑制活性にはヒドロキシアントラキノン構造が重要であると考えた。そこで、様々なヒドロキシアントラキノン誘導体を入手し、HCV NS3ヘリカーゼ抑制活性の強いものを探索した。その結果、HCV NS3ヘリカーゼ抑制活性の強い化合物としてsennidin Aとhypericinを見出した。次に、これら２つの化合物のHCV増殖抑制活性及び細胞毒性についてHCVレプリコン細胞を用いて検討を行った。その結果、sennidin AはHCV増殖抑制活性が見られなかったが、hypericinは細胞毒性が見られない濃度でHCV増殖抑制活性があった。更に、hypericinのHCV増殖抑制活性のメカニズムについて詳細に検討した結果、ATPアーゼ及びNS3タンパクのRNA結合を抑制することを見出した。従って、hypericin によるHCV NS3ヘリカーゼの活性低下は、ATPアーゼ及びNS3タンパクのRNA結合を抑制することによって起こり、その結果、HCVの増殖を抑制すると考えられた。また、NS2/3 プロテアーゼ活性抑制化合物については、昨年度から引き続き、海洋生物抽出物ライブラリー及び海洋生物由来精製化合物を入手し検討を行ったが、検討を行ったサンプルの中にはNS2/3 プロテアーゼ抑制活性を有するものは無かった。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of Hydroxyanthraquinones as Novel Inhibitors of Hepatitis C Virus NS3 Helicase. (2015)
  • 著者名/発表者名: Furuta A, Tsubuki M, Endoh M, Miyamoto T, Tanaka J, Salam KA, Akimitsu N, Tani H, Yamashita A, Moriishi K, Nakakoshi M, Sekiguchi Y, Tsuneda S, Noda N.
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Sciences 巻: 16 ページ: 18439-18453
  • DOI: 10.3390/ijms160818439
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Deep sequencing and phylogenetic analysis of variants resistant to interferon-based protease inhibitor therapy in chronic hepatitis induced by genotype 1b hepatitis C virus. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sato M, Maekawa S, Komatsu N, Tatsumi A, Miura M, Muraoka M, Suzuki Y, Amemiya F, Takano S, Fukasawa M, Nakayama Y, Yamaguchi T, Uetake T, Inoue T, Sato T, Sakamoto M, Yamashita A, Moriishi K, Enomoto N.
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 89 ページ: 6105-6116
  • DOI: 10.1128/JVI.03127-14.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification of antiviral agents targeting hepatitis B virus promoter from extracts of Indonesian marine organisms by a novel cell-based screening assay. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamashita A, Fujimoto Y, Tamaki M, Setiawan A, Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Kasai H, Watashi K, Wakita T, Toyama M, Baba M, de Voogd NJ, Maekawa S, Enomoto N, Tanaka J, Moriishi K.
  • 雑誌名: Marine Drugs 巻: 13 ページ: 6759-6773
  • DOI: 10.3390/md13116759.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Involvement of FKBP6 in hepatitis C virus replication. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kasai H, Kawakami K, Yokoe H, Yoshimura K, Matsuda M, Yasumoto J, Maekawa S, Yamashita A, Tanaka T, Ikeda M, Kato N, Okamoto T, Matsuura Y, Sakamoto N, Enomoto N, Takeda S, Fujii H, Tsubuki M, Kusunoki M, Moriishi K.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 5 ページ: 16699
  • DOI: 10.1038/srep16699.
• [雑誌論文] Hepatitis B virus efficiently infects non-adherent hepatoma cells via human sodium taurocholate cotransporting polypeptide. (2015)
  • 著者名/発表者名: Okuyama-Dobashi K, Kasai H, Tanaka T, Yamashita A, Yasumoto J, Chen W, Okamoto T, Maekawa S, Watashi K, Wakita T, Ryo A, Suzuki T, Matsuura Y, Enomoto N, Moriishi K.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 5 ページ: 17047
  • DOI: 10.1038/srep17047.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 海綿由来セキステルペン系化合物metachromin AのB型肝炎ウイルスコアプロモーター抑制活性を介した抗ウイルス活性. (2015)
  • 著者名/発表者名: 山下篤哉, 田中智久, 土橋香織, 葛西宏威, 渡士幸一, 脇田隆字, 外山正明, 馬場昌範, 前川伸哉, 榎本信幸, 玉城麻友美, 田中淳一, 森石恆司
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会 第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2015-12-01 – 2015-12-04
• [学会発表] B型肝炎ウイルスコアプロモーター転写阻害剤のハイスループットスクリーニング. (2015)
  • 著者名/発表者名: 古谷祐, 森田直子, 佐藤裕美, 山下篤哉, 森石恆司, 小嶋聡一
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会 第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2015-12-01 – 2015-12-04
• [学会発表] Metachromin A, sesquiterpene from marine sponge Dactylospongia metachromia, exerts anti-HBV activity via inhibition of HBV core promoter. (2015)
  • 著者名/発表者名: Atsuya Yamashita, Tomohisa Tanaka, Kaori Okuyama-Dobashi, Hirotake Kasai, Koichi Watashi, Takaji Wakita, Masaaki Toyama, Masanori Baba, Kohji Moriishi
  • 学会等名: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [学会発表] Hepatitis B virus downregulates expression of CIDE-B and CIDE-C and impairs lipid droplet growth. (2015)
  • 著者名/発表者名: Jun Yasumoto， Hirotake Kasai， Tomohisa Tanaka， Koichi Watashi，Takaji Wakita，Atsuya Yamashita，Kaori Dobashi-Okuyama1，Kohji Moriishi
  • 学会等名: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [学会発表] Inhibitory effect of tyrphostin derivative HD-31 on hepatitis C virus replication via regulation of reactive oxygen species production. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ryota Amano，Atsuya Yamashita，Hirotake Kasai，Kohji Moriishi
  • 学会等名: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [学会発表] Characterization of the IRES activity in equine hepacivirus 5’UTR. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tomohisa Tanaka，Chen Wenjia，Teruhime Otoguro，Hirotake Kasai，Atsuya Yamashita, Kohji Moriishi
  • 学会等名: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [学会発表] Screening of presenilin inhibitors for identification of anti-HCV compound. (2015)
  • 著者名/発表者名: Teruhime Otoguro，Tomohisa Tanaka，Hirotake Kasai，Atsuya Yamashita，Kohji Moriishi
  • 学会等名: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [学会発表] カイメン由来化合物metachromin A及びその類縁化合物の抗HBVの検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 山下篤哉, 田中智久, 葛西宏威, 渡士幸一, 脇田隆字, 外山正明, 馬場昌範, 前川伸哉, 榎本信幸, 玉城麻友美, 田中 淳一, 森石恆司
  • 学会等名: 第25回抗ウイルス療法学会
  • 発表場所: 国立感染症研究所（東京都新宿区）
  • 年月日: 2015-05-22 – 2015-05-24
• [備考] 山梨大学医学部 微生物学講座
  • URL: http://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical_basic/microbio/Microbiology_Yamanashi_Uni_Japanese/Home.html
• [備考] 山梨大学 研究者総覧
  • URL: http://erdb.yamanashi.ac.jp/rdb/A_DispInfo.Scholar/4_5_4/E88A6696C4043E75.html