肥満に伴う慢性肝疾患ＮＡＦＬＤにおける免疫の関与とその制御に関する解析

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25460992
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 宮城 琢也 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (80532986)
• 研究分担者: 巽 智秀 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20397699)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 非アルコール性脂肪性肝疾患

研究概要

非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）はメタボリック症候群の肝臓での表現形とされ、近年の肥満人口の増加に伴い注目されている肝疾患である。しかし、長期の経過で進行するため脂肪肝炎の進展から肝硬変、肝発癌といった病態の進展機序は解明されていない。申請者はこれまでにNKT細胞欠損マウスに高脂肪食を与えると、脂肪肝炎が増強することを示し、NAFLDの進展過程において免疫細胞が関与していることを報告している。平成25年度は、野生型マウスに高脂肪食を投与する食餌性肥満マウスを用いて脂肪付加が与える影響について観察した。野生型マウスにおいても長期投与で線維化が進行し、1年で20％、1.6年以上の投与では約70％で自然発癌が起きることが明らかとなった。免疫細胞については脂肪付加により肝臓内の免疫細胞数が増加するが、その細胞の構成は通常飼料を投与した場合と異なり、時間経過に伴いNKT細胞の割合は減少し反対に未熟骨髄細胞は増加することがわかった。なお、NK細胞については有意な変化をみとめなかった。また、肝硬変、発癌をみとめる1年投与群でみると未熟骨髄細胞から分泌されるといわれるS100A8/A9の遺伝子発現が有意に上昇していた。
以上より、食餌性肥満マウスにおいて肝硬変、肝癌を発症しその過程においてNKT細胞の低下や未熟骨髄細胞の増加が関与していることが示唆された。本研究結果はNAFLDの進展にはNKT細胞や未熟骨髄細胞の割合の変化があり、その進展予防のためにNKT細胞や未熟骨髄細胞の遊走を制御することが治療ターゲットになりうる可能性を示唆した、臨床的に意義の大きい成果である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

NAFLDはヒトにおいて長期の経過で進行するため脂肪肝炎から発癌するまでの過程は明らかでない。平成25年度では食餌性肥満マウスモデルを用いて、脂肪肝炎、肝硬変、自然発癌に至る過程を観察し野生型マウスにおいても脂肪付加により自然発癌することを示した。この結果はNAFLDにおいて脂肪肝から脂肪肝炎がおこる過程で免疫細胞の構成が変化していることから、NAFLDにおける免疫を介した治療の有用性を示唆したものであり、臨床上も非常に有意義であると考えている。研究結果も着実に出ており、本申請課題はおおむね順調に進展していると考えている。

今後の研究の推進方策

平成25年度の結果をもとに、NAFLD病態における未熟骨髄細胞とS100A8/A9の関与について検討を行う。具体的にはS100A8/A9の発現増加が未熟骨髄細胞に由来するかを免疫染色（多重染色）やフローサイトメトリー（細胞内S100A8/A9染色と細胞表面マーカーとの染色で検討する）また、抗S100A8/A9抗体投与やS100A9欠損マウスを用いた解析により、S100A8/A9発現抑制がNAFLD病態に与える影響や、S100A8/A9発現ベクター投与によるS100A8/A9過剰発現系を用いた解析によりS100A8/A9過剰発現がNAFLD病態に与える影響について検討を行う。

研究成果

• [学会発表] NAFLDの病態進展における骨髄球系細胞由来S100A8の意義 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向井香織 宮城琢也 竹原徹郎
  • 学会等名: 第40回 日本肝臓学会西部会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 20131206-20131207
• [学会発表] Immunological amplification of CXCL1-S100A8 loop via CXCR2-expressing CD11b+ Gr-1high cells in the development of nonalcoholic fatty liver disease. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kaori Mukai, Takuya Miyagi, Kumiko Nishio, Yoshinobu Yokoyama, Teppei Yoshioka, Yoshinobu Saito, Tsukasa Kawaguchi, Satoshi Aono, Satoshi Tanaka, Satoshi Shimizu, Hayato Hikita, Ryotaro Sakamori, Yoshihiro Kamada, Tomohide Tatsumi and Tetsuo Takehara
  • 学会等名: The 64th Annual Meeting of the American Association for the study of Liver Disease.
  • 発表場所: Washington, USA
  • 年月日: 20131102-20131105
• [学会発表] NAFLD病態進展における未熟骨髄由来細胞とS100A8/9蛋白の関与 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向井香織 宮城琢也 竹原徹郎
  • 学会等名: 第49回 日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130606-20130607
• [図書] NASH・アルコール性肝障害の診療を極める (2014)
  • 著者名/発表者名: 宮城琢也、 竹原徹郎
  • 総ページ数: 16-20
  • 出版者: 文光堂