| 研究課題/領域番号 |
25461007
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| 研究機関 | 大阪市立大学 |
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研究代表者 |
藤井 英樹 大阪市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (20382070)
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| 研究分担者 |
村上 善基 大阪市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (00397556)
河田 則文 大阪市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30271191)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 脂肪肝炎 / マクロファージ |
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| 研究実績の概要 |
【実験概要】C57BL/6マウス、♂(8週齢)およびMSR-A欠損 (MSR-A-/- ) マウス (C57BL/6バック)に対して通常食 (chow, n=4)およびメチオニン/コリン欠乏食(MCD) (MP Biomedicals #960439, n=6)を3週間投与し、24時間絶食の後肝臓、内臓脂肪及び尻尾を採取し、体重及び肝重量を測定した。肝組織の一般的評価としてH-E染色, 肝の脂肪化の評価をOil red O染色で確認した。肝組織中および血清中の脂質プロファイル(コレステロール、中性脂肪、遊離脂肪酸、リン脂質等リポ蛋白の主要分画)は高感度ゲル濾過HPLC法でを検討した。4群(Wild chow群、Wild MCD群、KO chow群、KO MCD群)間でのデータを比較検討した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
MSR-A KOマウスのSPF化が必用となり、約半年を要した。更にマウス繁殖、維持に数ヶ月間を要した。このため、in vivoモデルの再現性の検討が遅れている状況である。
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| 今後の研究の推進方策 |
in vitroの系として以下の2つを検討している。
① Macrophage (Mφ)のcell lineを購入し、MSR-AをKOしたものとしないものでhepatocyteのcell lineとcocultureし、FFA滴下によるhepatocyteの細胞内TGの程度を確認する。条件としてa) Mφとhepatocyteが接触している場合、b)接触していない場合を検討する。
② MSR-A KOマウスのliver、bloodよりMφを抽出し、①と同様の系を行う。
in vivoの系としては
一方、以前検討したMCDモデルの再現性を検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究実績に記載したように、マウスのSPF化に時間を要し、その間in vivoの検討が出来なかった。
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| 次年度使用額の使用計画 |
in vitroの系を先行して検討する予定とした。つまり、ヒトmacrophageのcell lineを用い、MSR-AをKOしたものとしないものでhepatocyteのcell lineとcocultureし、FFA滴下によるhepatocyteの細胞内TGの程度を確認する系を予定している。
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