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我々は膵癌細胞の浸潤・転移を抑制する分子としてbinder of Arl Two (BART)を同定し、BARTは低分子量G タンパク質Rac1活性を直接抑制することを明らかにした。本研究の目的は、BARTが認識するRac1および過去に報告されたBART結合性低分子量G タンパク質ARL2の両者との結合部位のアミノ酸配列を同定することである。研究期間内に以下の実験を行い、上述の命題について明らかにしていく。
「Rac1およびARL2それぞれの全アミノ酸配列に対し、N末から約30アミノ酸毎にGST融合タンパクを作成し、BART、ARL2、Rac1のすべてを発現している膵癌細胞株S2-013のライセートを用いてGSTプルダウンを行った。BARTとの結合部位を含むRac1およびARL2由来の領域を同定した。推察される結合部位に対するペプチドをRac1とARL2それぞれに対して複数合成した。BARTとRac1およびARL2との結合を阻害するペプチドを同定するために、S2-013のライセートを用いてGSTプルダウンを行った。ペプチドがBARTとRac1およびARL2との結合を阻害するかをwestern blotを行った。現在、結果の再現性を確認中である。」
平成27年度までに予定していた研究計画は、ほぼ予定通りに行われた。
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