CpGDNA配列に着目した非結核性抗酸菌症の病態解明と新規治療法の開発

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25461145
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 榊原 智博 東北大学, 大学病院, 助教 (80422111)
• 研究分担者: 菊地 利明 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (10280926)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 非結核性抗酸菌症 / CpG-DNA / TLR9

研究概要

非結核性抗酸菌症（NTM症）は原因菌が同一であっても、その病態、病状の進行度は個々の患者で大きく異なる。NTM症はその進行度と、主な原因菌であるMycobacterium avium菌株の遺伝子型に関連があることが報告されており、またNTM症のうち過敏性肺臓炎様の疾患であるHot tub lungはToll様受容体（TLR）９が関与していることも示されている。一方乳酸菌では菌株間でゲノム内のCpGDNA（TLR9のリガンド）配列に相違があり、宿主への免疫刺激性が異なることが知られている。よって本研究はavium菌株間のゲノム上に存在するTLR9のリガンドであるCpGDNA配列に着目し、菌株間でのCpGDNA配列の相違、免疫刺激性の相違を明らかにし、さらにNTM症の病態解明、新規治療法の開発を目的とした。
まず患者の喀痰検体から分離培養し保存したMycobacterium avium菌（Hot tub lung患者から分離した菌株を含む）を新たに液体培地で培養し、増殖したのちに遠心分離し、そのゲノムDNAを精製した。精製したDNAは制限酵素Sau3AIで消化、断片化してエタノール沈殿方法で再度精製を行った。次に採血した全血からヒト末梢血単核球を分離培養し、その培養上清中に、上記の方法で精製したMycobacterium avium菌のゲノムDNAを加えて、２４時間培養した。その後培養上清を採取し、ELISA法でIFN-アルファを測定した。その結果Mycobacterium aviumの菌株間でゲノムDNAのよる免疫細胞の刺激性に相違は認めなかった。またTLR9を発現しているヒト形質細胞様樹状細胞の細胞株であるPMDC05を用いて同様の実験を行ったが、同様にMycobacterium aviumの菌株間でゲノムDNAのよる免疫細胞の刺激性に相違は認めなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Randomized Phase II Trial Comparing Carboplatin Plus Weekly Paclitaxel and Docetaxel Alone in Elderly Patients With Advanced Non-Small Cell Lung Cancer: North Japan Lung Cancer Group Trial 0801. (2014)
  • 著者名/発表者名: Maemondo M, Inoue A, Sugawara S, Harada T, Minegishi Y, Usui K, Miwa K, Morikawa N, Kambe M, Ube K, Watanabe K, Ishimoto O, Sakakibara T, Gemma A, Nukiwa T.
  • 雑誌名: Oncologist 巻: 19 ページ: 352-353
  • DOI: 10.1634/theoncologist.2013-0411
  • 査読あり
• [雑誌論文] An effective enrichment strategy for EML4-ALK fusion gene screening in patients with non-small cell lung cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Sakakibara T, Inoue A, Fukuhara T, Sasano H, Ichinose M, Nukiwa T.
  • 雑誌名: Respir Investig 巻: ５２ ページ: 49-56
  • DOI: 10.1016/j.resinv.2013.06.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Randomized phase II trial of uracil/tegafur and cisplatin versus vinorelbine and cisplatin with concurrent thoracic radiotherapy for locally advanced unresectable stage III non-small-cell lung cancer: NJLCG 0601. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sugawara S, Maemondo M, Tachihara M, Inoue A, Ishimoto O, Sakakibara T, Usui K, Watanabe H, Matsubara N, Watanabe K, Kanazawa K, Ishida T, Saijo Y, Nukiwa T; North Japan Lung Cancer Study Group
  • 雑誌名: Lung Cancer 巻: 81 ページ: 91-96
  • DOI: 10.1016/j.lungcan.2013.04.010
  • 査読あり
• [学会発表] EGFR遺伝子変異を伴う家族性肺腺癌患者におけるエクソーム解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 東出直樹、菊地利明、榊原智博、齋藤良太、光石陽一郎、大河内眞也、井上彰、一ノ瀬正和
  • 学会等名: 第７２回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 20131004-20131004