| 研究課題/領域番号 |
25461163
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
東元 一晃 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (60363628)
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| 研究分担者 |
井上 博雅 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (30264039)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | ムスカリン受容体 / コリンアセチルトランスフェラーゼ |
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| 研究概要 |
今年度は主に臨床検体の採取、収集およびモデル動物の作成を実施している。
喘息患者の末梢血および喀痰採取。肺癌手術摘出肺の非癌部を組織標本として採取。アレルギー性喘息のマウスモデル（卵白アルブミンOVA感作曝露、ダニ抗原の感作曝露）の作製である。
上記の細胞から分離した各種炎症細胞、肺標本（手術摘出肺、喘息モデルマウス肺）から作製した細胞浮遊液を使用して、免疫染色、フローサイトメトリーを用いて、ムスカリン受容体とコリンアセチルトランスフェラーゼの発現の確認を行いつつ、その刺激によって細胞から産生されるサイトカイン、ケモカインなどの検討を行うための培養上清を収集しつつある。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
マウスモデル作成は順調に進行し、組織検体、BAL液は保存されている。
また、ヒト検体の収集、解析については、喘息患者からの検体採取が予想よりも遅れているが、徐々に進められてきている。
また、検体の処理および免疫組織染色、フローサイトメトリー等の条件設定を行い、実施していく段階に入ってきている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今年度以降は収集した検体の免疫染色、フローサイトメトリー、mRNA解析などを実施していくとともに、さらなる患者検体の収集を推進していく。
また、採取した細胞等の培養実験も開始し、カルバコール等によるコリン性の刺激実験を推進し、それによって生じるサイトカイン、ケモカインなどの解析も順次行っていく。
喘息に対するムスカリン受容体拮抗薬の影響を確認するために、すでに確立している喘息マウスモデル（OVA感作曝露）に、抗コリン薬（ムスカリンM3受容体拮抗薬；Tiotropium、Acridinium）を投与した際の気道過敏性の変動、気道組織、BAL細胞等を収集し、それらを解析することで気道炎症に与える影響を検討していく。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
検体収集が未だ十分ではないため、測定作業等の遅れが生じているため、消耗品に用いる予定の金額が次年度使用予定となっている。
フローサイトメトリーや免疫染色等の抗体、さらにサイトカイン、ケモカイン等の測定のためのELISAキットなど消耗品に使用される予定である。
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