HTLV-1関連脊髄症において新規に同定した病原性ヘルパーCD4+T細胞の解析

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25461294
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 山野 嘉久 聖マリアンナ医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80445882)
• 研究分担者: 三須 建郎 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00396491)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 内科系臨床医学 / 神経内科学 / 神経病態免疫学

研究概要

近年、免疫性疾患の病態形成における“CD4+ ヘルパーT細胞の分化異常”の重要性が注目されている。HTLV-1関連脊髄症（HAM）は、ヒトT細胞白血病ウイルス（HTLV-1）感染者の一部に発症する脊髄の慢性炎症性疾患であり、我々は最近、HAM患者の髄液と脊髄組織において、ウイルスの作用によって分化異常を来したと考えられる新規の病原性CD4+ ヘルパーT細胞（CCR4+CXCR3+ CD4+ T細胞）を発見した。この研究では、本細胞に着目して解析を進めその特性を明らかにし、本細胞に基づくHAMの診断や治療応用へと展開するための研究基盤の確立を目的とする。
平成25年度は、まず本細胞の炎症惹起性について検討した。本細胞の産生サイトカインプロファイルの解析により、IFN-γの自発的な過剰産生能を有していることを明らかにした。次に、HAM患者脊髄病変におけるIFN-γ産生性の本細胞の存在を証明。また、本細胞からのIFN-γ産生刺激による脊髄astrocyteからのCXCL10（CXCR3リガンド）過剰産生誘発と、それによるCXCR3+ T細胞の遊走が、HAMの脊髄における炎症慢性化機構の主軸となっていることを証明し、論文発表した（Brain, 2013）。
また、HAM患者髄液由来の本細胞の、蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）法によるHTLV-1感染率、病変部における占拠率、増殖能、T細胞分化関連転写因子の発現、等の解析を進め、論文投稿を完了した。この特異な細胞の解析は、HAMの免疫病態を明らかにするだけでなく、様々な免疫性疾患の病態理解に繋がると考えられる。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本細胞の特性を解析することにより、これまで不明であったHAMにおける炎症慢性化機構を明らかとし、新規の治療薬に結びつく成果をまとめ、国際的な一流雑誌に掲載された（Brain, 2013）。また、本細胞の発生機構や病変部における占拠率等を明らかにして論文化し投稿を完了しており、研究活動はおおむね順調に進展していると考える。

今後の研究の推進方策

同一HAM患者から、髄液CCR4+CXCR3+ CD4+ T細胞、末梢血CCR4+ CD4+ T細胞、末梢血CXCR3+ CD4+ T細胞をFACS sortingで分離して、それぞれの遺伝子発現をマイクロアレイで比較解析する（複数例で実施）。この解析で、本細胞に特徴的な細胞表面発現分子や特徴的な細胞内シグナルを明らかにすることが可能となり、それは将来の新規な治療応用への発展や、本細胞の新たな発生機構解明に役立つ基盤情報の獲得に結びつく。

研究成果

• [雑誌論文] HTLV-1関連脊髄症（HAM）に対する分子標的治療薬開発の現状と将来. (2014)
  • 著者名/発表者名: 新谷奈津美, 山野嘉久.
  • 雑誌名: 血液内科 巻: 68（1） ページ: 30-35
• [雑誌論文] 希少な慢性進行性の神経難病HAMにおける治療有効性評価モデルの探索. (2014)
  • 著者名/発表者名: 山野嘉久.
  • 雑誌名: 臨床評価 別冊 巻: 41(3) ページ: 504-508
• [雑誌論文] Positive feedback loop via astrocytes causes chronic inflammation in virus-associated myelopathy. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ando H., Sato T., Tomaru U., Yoshida M., Utsunomiya A., Yamauchi J., Araya N., Yagishita N., Coler-Reilly A., Shimizu Y., Yudoh K., Hasegawa Y., Nishioka K., Nakajima T., Jacobson S., Yamano Y.
  • 雑誌名: Brain 巻: 136(Pt9) ページ: 2876-2887
  • DOI: 10.1093/brain/awt183.
  • 査読あり
• [雑誌論文] CSF CXCL10, CXCL9, and Neopterin as Candidate Prognostic Biomarkers for HTLV-1-Associated Myelopathy/Tropical Spastic Paraparesis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sato T., Coler-Reilly A., Utsunomiya A., Araya N., Yagishita N., Ando H., Yamauchi J., Inoue E., Ueno T., Hasegawa Y., Nishioka K., Nakajima T., Jacobson S., Izumo S., Yamano Y.
  • 雑誌名: PLoS Negl Trop Dis 巻: 7(10) ページ: e2479
  • DOI: 10.1371/journal.pntd.0002479. eCollection 2013.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preapoptotic protease calpain-2 is frequently suppressed in adult T-cell leukemia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishihara M., Araya N., Sato T., Tatsuguchi A., Saichi N., Utsunomiya A., Nakamura Y., Nakagawa H., Yamano Y., Ueda K.
  • 雑誌名: Blood 巻: 121(21) ページ: 4340-4347
  • DOI: 10.1182/blood-2012-08-446922.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential contribution of a novel Tax epitope-specific CD4+ T cells to graftversus-Tax effects in adult T-cell leukemia patients after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tamai Y., Hasegawa A., Takamori A., Sasada A., Tanosaki R. Choi I., Utsunomiya A., Maeda Y., Yamano Y., Eto T., Koh K., Nakamae H., Suehiro Y., Kato K., Takemoto S., Okamura J., Uike N., Kannagi M.
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 190(8) ページ: 4382-4392
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1202971.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 慢性型ATLの自然寛解後にHTLV-1関連脊髄症を発症した症例. (2013)
  • 著者名/発表者名: 宇都宮與, 山野嘉久.
  • 雑誌名: 血液フロンティア 巻: 23(3) ページ: 5-10
• [雑誌論文] Human T-lymphotropic virus type 1感染者における腎移植の影響. (2013)
  • 著者名/発表者名: 山内淳司、八木下尚子、安藤仁、佐藤知雄、新谷奈津美、Ariella, Coler-Reilly、今井直彦、中澤龍斗、佐々木秀郎、柴垣有吾、安田隆、力石辰也、木村健二郎、山野嘉久.
  • 雑誌名: 日本臨床腎移植学会雑誌 巻: 1(1) ページ: 55-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] 白血病 非定型白血病および特殊型 HTLV-1関連脊髄症（HAM）. (2013)
  • 著者名/発表者名: 山野嘉久、佐藤知雄、宇都宮與.
  • 雑誌名: 別冊日本臨牀 新領域別症候群シリーズ 血液症候群（第2版） 巻: 23(III) ページ: 195-199
• [雑誌論文] HTLV-1関連脊髄症（HAM）の病態・治療とバイオマーカー (2013)
  • 著者名/発表者名: 山野嘉久、佐藤知雄
  • 雑誌名: 日本臨牀 巻: 71（5） ページ: 870-875
• [学会発表] HAMにおける抗CCR4抗体製剤の有用性に関する検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山野嘉久, 山内淳司, 新谷奈津美, 安藤仁, Ariella Color-Reilly, 八木下尚子, 宇都宮與, 佐藤知雄.
  • 学会等名: 第25回日本神経免疫学会学術集会
  • 発表場所: 山口県（下関市）〔海峡メッセ下関〕
  • 年月日: 20131127-20131129
• [学会発表] 同種造血幹細胞移植後ATL患者からの新規HTLV-1特異的CD4エピトープの同定（Identification of novel HTLV-1-specific CD4 epitopes in ATL patients after hematopoietic stem cell transplantation.） (2013)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa A., Tamai Y., Takamori A., Sasada A., Tanosaki R., Choi I., Utsunomiya A., Suehiro Y., Maeda Y., Yamano Y., Uike N., Kannagi M.
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川県（横浜市）〔パシフィコ横浜〕
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] 成人T細胞白血病ウイルス関連疾患における新規治療標的同定を目的とした定量膜プロテオームプロファイリング. (2013)
  • 著者名/発表者名: 石原誠人、新谷奈津美、佐藤知雄、宇都宮與、中川英刀、山野嘉久、植田幸嗣.
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川県（横浜市）〔パシフィコ横浜〕
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] Label free quantitative proteome analysis on cerebrospinal fluid to discover severity grade markers for Human T-cell leukemia virus type 1 associated myelopathy/tropic spastic paraparesis (HAM/TSP). (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishihara M, Araya N, Sato T, Fujii R, Tatsuguchi A, Saichi N, Nakagawa H, Yamano Y, Ueda K.
  • 学会等名: HUPO 2013 12th Annual World Congress
  • 発表場所: Kanagawa, Japan
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] HTLV-1関連脊髄症（HAM）の治療標的としてのCCR4+CD4+T細胞 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐藤知雄、新谷奈津美、安藤仁、Ariella Coler-Reilly、山内淳司、八木下尚子、山野嘉久.
  • 学会等名: 第6回HTLV-1研究会・シンポジウム
  • 発表場所: 東京都（港区）〔東京大学医科学研究所講堂〕
  • 年月日: 20130823-20130825
• [学会発表] Development of novel molecular targeted therapies for HAM/TSP. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamano Y.
  • 学会等名: 第6回HTLV-1研究会・シンポジウム／第3回HTLV-1国際シンポジウム
  • 発表場所: 東京都（港区）〔東京大学医科学研究所講堂〕
  • 年月日: 20130823-20130825
  • 招待講演
• [学会発表] 脳脊髄液プロテオーム解析によるヒトTリンパ好性ウイルス関連脊髄症(HAM/TSP)に対する重症度診断アルゴリズムの構築. (2013)
  • 著者名/発表者名: 石原 誠人、新谷奈津美、佐藤知雄、山野嘉久、中川英刀、植田幸嗣.
  • 学会等名: 第6回HTLV-1研究会・シンポジウム
  • 発表場所: 東京都（港区）〔東京大学医科学研究所講堂〕
  • 年月日: 20130823-20130825
• [学会発表] CXCL10 and Neopterin in cerebrospinal fluid are Candidate Prognostic Biomarkers for HTLV-1-Associated Myelopathy/Tropical Spastic Paraparesis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamano Y., Sato T., Ando H., Araya N., Yagishita N., Yamauchi J., Coler-Reilly A., Utsunomiya A., Jacobson S., Izumo S.
  • 学会等名: The 16th International Conference on Human Retrovirology: HTLV and Related Viruses
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 20130626-20130630
• [学会発表] Virus-induced CXCL10-CXCR3 positive feedback loop via astrocytes is critical for maintaining chronic inflammatory lesions in HAM/TSP. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sato T., Ando H., Tomaru U., Yoshida M., Utsunomiya A., Yamauchi J., Araya N., Yagishita N., Coler-Reilly A., Jacobson S., Yamano Y.
  • 学会等名: The 16th International Conference on Human Retrovirology: HTLV and Related Viruses
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 20130626-20130630
• [学会発表] CXCL10, CXCL9 and Neopterin in cerebrospinal fluid as Candidate Prognostic Biomarkers for HAM/TSP. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamano Y., Sato T., Coler-Reilly A., Ando H., Araya N., Yagishita N., Yamauchi J., Utsunomiya A., Jacobson S., Izumo S.
  • 学会等名: The 16th International Conference on Human Retrovirology: HTLV and Related Viruses
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 20130626-20130630
• [学会発表] Nation-wide epidemiological study in Japan on HTLV-1 associated myelopathy/tropical spastic paraparesis using HAM-net, a novel patient registration system. (2013)
  • 著者名/発表者名: Coler-Reilly A., Hashimoto M., Yagishita N., Sato T., Ando H., Yamauchi J., Araya N., Kimura M., Yamano Y., Takata A.
  • 学会等名: The 16th International Conference on Human Retrovirology: HTLV and Related Viruses
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 20130626-20130630
• [備考] 聖マリアンナ医科大学 難病治療研究センター 病因・病態解析部門
  • URL: http://nanchiken.jp/