| 研究課題/領域番号 |
25461377
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
岩本 禎彦 自治医科大学, 医学部, 教授 (10232711)
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| 研究分担者 |
中山 一大 自治医科大学, 医学部, 講師 (90433581)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 脂質異常症 / 分子間相互作用 / 非アルコール性脂肪肝 / 遺伝的関連解析 |
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| 研究実績の概要 |
ゲノムワイド関連解析（GWAS）によって新たに見出された血中コレステロールとトリグリセリド値に関連する遺伝子のひとつTRIB1の機能解析の結果、TRIB1の新たな結合パートナーとしてMLXIPLを見出した。脂質合成のマスター転写因子であるMLXIPLは、TRIB1との分子間相互作用の結果、ユビキチン・プロテアソーム系による分解が促進され、脂質合成が負に制御される。また、血清脂質レベルとの関連が見出されたTRIB1下流の連鎖不平衡ブロックのSNPは、非アルコール性脂肪肝（NAFLD）とも深い関連を示すことを見出した。
MLXIPLは血清トリグリセリド値と深い関連を示すが、NAFLDとの関連は認められていないことから、TRIB1は他のターゲット分子との相互作用を介して、肝細胞内脂質レベルの調節を行っている可能性が示唆された。それを新たに同定する目的で、イースト２ハイブリッド法を用いたスクリーニングを行った。得られたターゲット候補分子をノックダウンするアデノウイルスベクターを構築し、マウスに導入して機能的スクリーニングを行った結果、SAP18の肝臓での発現低下が、血清脂質の有意な減少と肝臓内の脂質の蓄積をもたらすことが明らかになり、SAP18はTRIB1と共同してSin3AとともにMTTP遺伝子の発現制御に働くことが明らかになった。
GWASによって見出された血清脂質関連ゲノム領域の中で、機能性分子が同定されていなかった19番染色体短腕の約300kbの強い連鎖不平衡ブロックNCAN-CILP2領域に、機能性の候補遺伝子TM6SF2が見出され、東アジア5人種7集団において遺伝的検証を行った。その結果、TM6SF2遺伝子の稀なミスセンスSNPは血清コレステロールとトリグリセリド値に強く関連すること、NAFLDとも強く関連することを見出した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初予定していた３つの課題は2年間で、以下のようにほぼ達成されつつある。
①遺伝解析に基づいて同定された血清脂質関連遺伝子における機能性多型は、TRIB1遺伝子の発現制御配列の機能変化をもたらすSNPとNCAN-CILP2領域のミスセンスSNPを同定することができた。
②新規脂質関連遺伝子の機能的検証ならびに関連する代謝パスウェイの探索についても、TRIB1－MLXIPLという新たな制御パスウェイの発見に至った
③新規脂質関連遺伝子産物が関与する分子間相互作用の探索では、TRIB1と相互作用するSAP18という新規結合パートナーを見出し、血清ならびに肝細胞内脂質レベルに影響を与える新規分子を同定できた。
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| 今後の研究の推進方策 |
①新規脂質関連遺伝子産物が関与する分子間相互作用する新たな分子の血清脂質調節における機能的検証： shRNAテンプレートを用いたTRIB1の発現レベルの低下はエネルギー代謝の日内変動に関連する可能性が認められたため、コンディショナルノックアウトマウスを用いてこれをさらに検証し、TRIB1の生理的役割をさらに明らかにする。
②新規脂質関連遺伝子の機能的検証と関連する代謝パスウェイの探索： NCAN-CILP2領域における機能分子の絞り込みをさらに進め、脂質レベル調節の新規代謝パスウェイの同定を目指す。
③血清脂質関連分子の遺伝学的検証： TRIB1と相互作用することが明らかになった分子、NCAN-CILP2領域における機能分子が同定された後、それらの遺伝的バリエーションが血清脂質レベルに影響するかどうか、SNP関連解析や次世代シークエンサーを用いたレアバリアントの探索を行う。
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