低線量被曝からMDS発症に至る疫学的解析および分子発症プロセスの解明

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25461422
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 原田 結花 順天堂大学, 医学部, 助教 (50379848)
• 研究分担者: 原田 浩徳 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10314775)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 低線量被曝 / 骨髄異形成症候群 / RUNX1変異 / BMI1

研究概要

骨髄異形成症候群（MDS）の発症機構の主要部を担う遺伝子異常の一つであるRUNX1変異は，化学療法や放射線療法後の治療関連造血器腫瘍症例に高率に認められ，放射線や化学療法によるMDSのバイオマーカーの１つと考えられる。原爆被爆者では，遠距離直爆例などの低線量被曝症例にも認められることから，これまでほとんど解析されていなかった低線量被曝に注目した。本研究「低線量被曝からMDS発症に至る疫学的解析および分子発症プロセスの解明」は，低線量被曝後非常に長い期間を経てMDSを発症する症例を解析し，過剰発生率の推定およびRUNX1変異を中心とした遺伝子異常の解明を試み，低線量被曝による長期的な健康被害の実態解明と示唆を行うものである。
MDS/AML患者について，被爆状況特に黒い雨への曝露歴などを聞き取り調査して低線量被曝者を抽出し，検体を採取する。また被爆者データベース（ABS）を用いて，過去の患者（主に2003年以降，可能であれば1962年～2002年の期間も）においても低線量被曝症例を抽出する。新規または保存患者サンプルを用いてRUNX1変異などの遺伝子異常を検索し，被曝線量との関係を解析する。また新規サンプルを用いた網羅的な遺伝子発現・遺伝子変異の解析を行い，低線量被曝後MDS/AMLの発症に関わる遺伝子異常を解明する。さらに，低線量被曝がMDS/AML発症に及ぼす影響について，統計学的解析を行い，低線量被曝による人体影響を予測する。
平成25年度は，既存の症例および新規患者から抽出したDNAを用いて変異解析を行い，放射線被曝との関連が認められるRUNX1変異と様々な協調遺伝子との関連について，変異解析並びに発現量解析を行った。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

研究代表者が所属機関を変更（広島大学から順天堂大学）したため、研究環境の立ち上げに多少時間を要した。しかし、既に研究環境整備は完了し、広島大学との共同研究体制も問題なく行えることから、本研究課題実施期間において研究を達成できる予定である。

今後の研究の推進方策

前年度に十分行えなかった低線量被曝症例の抽出を行い、遺伝子異常を解析する。
“黒い雨”などの低線量被曝症例の抽出
（１）新規発症MDS/AML患者…新規にMDS/AMLを発症した患者，順天堂医院および関連病院受診中のMDS/AML患者について，被爆時爆心地からの距離，黒い雨への曝露歴の有無および原爆投下後の爆心地付近への立ち入り（入市被爆）を調査する。被爆者健康手帳を保有している症例では比較的容易であるが，黒い雨被害者は蔑視・偏見の歴史があったために家族にも明かしていない場合もあるので，本人への詳細な聞き取りが必要である。研究へのインフォームド・コンセントが得られたMDS/AML患者の骨髄液あるいは末梢血から，DNA・RNAを抽出する。またCD34陽性細胞を分取し，RNAを抽出する。
（２）低線量被曝症例の掘り起こしと解析…1962年以降，広島大学病院血液内科を受診したMDS/AML患者（すでに死亡した症例を含む）について，被爆者データベース（ABS）を用い，遠距離被爆，入市被爆および黒い雨曝露状況の調査を行う。ABS利用にあたっては，広島大学原爆放射線医科学研究所大瀧　慈博士、同被ばく資料調査解析部部長瀧原義宏博士および大学院生に研究協力を依頼する。カルテに詳細な被爆状況が記載されていない症例では，実際に黒い雨にあったかどうかを聞き取り調査票原紙で確認する。調査票のない症例では，当研究所佐藤裕哉博士に研究協力を依頼し，原爆投下時の居所・居住地域から位置情報を正確に特定して黒い雨曝露の有無を推測・確定する。患者情報，DNA・RNAサンプルの保存状況を確認し，解析を行う。

次年度の研究費の使用計画

研究代表者が所属機関を変更（広島大学から順天堂大学）したため、研究環境の立ち上げに多少時間を要し、試薬等の購入に多少遅れが生じた。
研究環境整備が完了したことから、平成26年度には全額使用して研究を遂行する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] RUNX1/AML1 mutant collaborates with BMI1 overexpression in the development of human and murine myelodysplastic syndromes (2013)
  • 著者名/発表者名: Harada Y, Inoue D, Ding Y, Imagawa J, Doki N, Matsui H, Yahata T, Matsushita H, Ando K, Sashida G, Iwama A, Kitamura T, Harada H
  • 雑誌名: Blood 巻: 121(17) ページ: 3434-3446
  • DOI: 10.1182/blood-2012-06-434423
  • 査読あり
• [雑誌論文] High early death rate in elderly patients with acute promyelocytic leukemia treated with all-trans retinoic acid combined chemotherapy (2013)
  • 著者名/発表者名: Imagawa J, Harada Y, Shimomura T, Tanaka H, Okikawa Y, Harada H
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 98(2) ページ: 264-266
  • DOI: 10.1007/s12185-013-1390-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Myelodysplastic syndromes are induced by histone methylation-altering ASXL1 mutations (2013)
  • 著者名/発表者名: Inoue D, Kitaura J, Togami K, Nishimura K, Enomoto Y, Uchida T, Kagiyama Y, Kawabata KC, Nakahara F, Izawa K, Oki T, Maehara A, Isobe M, Tsuchiya A, Harada Y, Harada H, Ochiya T, Aburatani H, Kimura H, Thol F, Heuser M, Levine RL, Abdel-Wahab O, Kitamura T
  • 雑誌名: J Clin Invest 巻: 123(11) ページ: 4627-4640
  • DOI: 10.1172/JCI70739
  • 査読あり
• [雑誌論文] MDSに対するメチル化阻害剤による治療の現状と展望 (2013)
  • 著者名/発表者名: 原田結花，原田浩徳
  • 雑誌名: 血液内科 巻: 66(3) ページ: 316-322
• [雑誌論文] 原田結花，原田浩徳 低リスクMDSに対するレナリドミド (2013)
  • 著者名/発表者名: 原田結花，原田浩徳
  • 雑誌名: 血液内科 巻: 67(3) ページ: 305-312
• [雑誌論文] CMML発症のゲノム異常 (2013)
  • 著者名/発表者名: 原田結花，原田浩徳
  • 雑誌名: 血液内科 巻: 67(5) ページ: 631-637
• [学会発表] C-terminal-truncating ASXL1 mutations induce MDS via inhibition of PRC2 (2013)
  • 著者名/発表者名: Inoue D, Kitaura J, Togami K, Nishimura K, Enomoto Y, Uchida T, Kagiyama Y, Kawabata KC, Nakahara F, Oki T, Harada H, Ochiya T, Aburatani H, Kimura H, Thol F, Heuser M, Levine RL, Abdel-Wahab O, Kitamura T
  • 学会等名: The 55th ASH Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: New Orleans, USA
  • 年月日: 20131207-20131210
• [学会発表] The genetic landscape of FPD/AML revealed CDC25C mutation as a driver that promotes malignant transformation (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshimi A, Toya T, Nakagawa M, Kawazu M, Nannya Y, Ichikawa M, Arai S, Harada H, Usuki K, Hayashi Y, Ito E, Kirito K, Nakajima H, Mano H, Kurokawa M
  • 学会等名: The 55th ASH Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: New Orleans, USA
  • 年月日: 20131207-20131210
• [学会発表] A nationwide survey of hypoplastic myelodysplastic syndrome (a multicenter retrospective study) (2013)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Nannya Y, Ichikawa M, Kohara T, Kobune M, Harada H, Yonemura Y, Matsuda A, Kawabata H, Tohyama K, Miyazaki Y, Kurokawa M
  • 学会等名: The 75th Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 20131011-20131013
• [学会発表] Preliminary results of a randamized dose-finding study of darbepoetin alfa in MDS in Japan and Korea (2013)
  • 著者名/発表者名: Shibayama H, Harada H, Jun Ho Jang, Suzuki K, Tsudo M, Ishikawa T, Uike N, Hidaka M, Usuki K, Shimizu S, Kim Y-J, Kim H, Kizaki M, Chiba S, Nannya Y, Yonemura Y, Sawa M, Ogura H, Nakazato T, Kumagai T, Kiguchi T, Takahashi T, Irie S, Mitani K, Sawada K, et al.
  • 学会等名: The 75th Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 20131011-20131013
• [学会発表] RUNX1 mutant collaborates with BMI1 overexpression in the development of human and murine MDS/AML (2013)
  • 著者名/発表者名: Harada H, Harada Y, Inoue D, Ding Y, Matsui H, Sashida G, Iwama A, Kitamura T
  • 学会等名: The 75th Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 20131011-20131013
• [学会発表] RUNX3 overexpression may participaten in the development of MDS/AML (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyama T, Harada Y, Ichinose T, Harada H
  • 学会等名: The 75th Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 20131011-20131013
• [学会発表] アザシチジンによるMDS治療．［ランチョンセミナー：骨髄異形成症候群（MDS）の分子病態、診断と治療］ (2013)
  • 著者名/発表者名: 原田浩徳
  • 学会等名: 第11回日本臨床腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20130829-20130831
  • 招待講演
• [学会発表] RUNX1/AML1 mutants collaborate with BMI1 in the development of myelodysplastic syndromes (2013)
  • 著者名/発表者名: Harada H, Harada Y, Inoue D, Kitamura T
  • 学会等名: EMBO Workshop RUNX transcription factors in development & disease (19th International RUNX Workshop)
  • 発表場所: Wilsede, Germany
  • 年月日: 20130616-20130619
  • 招待講演
• [図書] エピゲノム異常と発がん 新・カラーテキスト血液病学（木崎昌弘編） (2013)
  • 著者名/発表者名: 原田結花，原田浩徳
  • 総ページ数: 687
  • 出版者: 中外医学社