活性化NK細胞療法の臨床応用に関する研究

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25461443
• 研究機関: 東京女子医科大学
• 研究代表者: 田中 淳司 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (50250452)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: NK細胞 / 細胞療法 / 悪性リンパ腫

研究実績の概要

悪性リンパ腫などの血液悪性疾患患者末梢血をリンパ球ソースとし、特別な処理を行う事なく全血単核球を用いてIL-2, IL-15などのサイトカインと抗CD3抗体であるOKT3を用いて活性化NK細胞を培養増幅する有効な方法を検討しました。また培養の際にT細胞の増殖を抑制する作用のあるタクロリムスの添加がNK細胞増殖に悪影響を及ぼさずにT細胞の増殖を抑制しうることが明らかとなりました。さらに通常使用されることの多い細胞性フィーダーを用いなくともヘパリン成分であるダルテパリンを添加することによって、NK細胞増殖効率が向上することが確認されました。
このような実験結果をふまえて、活性化NK細胞療法を臨床応用するためにGMPグレードの無血清培地にヒト血清を添加したうえで24 well plateではなく３００mlバッグにてclinical scaleでの培養実験を行いました。この結果、NK細胞実数として培養前の約1,000倍、1x10９レベルまで増幅する事が可能でした。
このようにして培養増幅したNK細胞が有する細胞障害活性の強さを白血病細胞株であるK562を標的細胞として検討し、T細胞のような前感作を必要としない強い細胞障害活性が確認されました。
再発難治の悪性リンパ腫の予後は不良ですが、抗CD20抗体リツキサンを抗がん剤と併用すると効果が期待されます。さらにリツキサンの抗腫瘍効果はNK細胞などによってもたらされます。そこで悪性リンパ腫患者末梢血より培養増幅した活性化NK細胞を用いた自家NK細胞療法についての臨床研究（培養増幅した活性化NK細胞の安全性に関するPhase I/II）を計画し、当院倫理委員会の承認のもと臨床研究を開始しました。患者体重当たり1x106/kg　３症例に施行し有害事象はなかったため、3x106/kg　1症例に施行し有害事象は認められませんでした。今後も症例を追加して検討していく予定です。

研究成果

• [雑誌論文] Impact of MRD and TKI on allogeneic hematopoietic cell transplantation for Ph+ALL: a study from the Adult ALL WG of the JSHCT. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishiwaki S, Imai K, Mizuta S, Kanamori H, Ohashi K, Fukuda T, Onishi Y, Takahashi S, Uchida N, Eto T, Nakamae H, Yujiri T, Mori S, Nagamura-Inoue T, Suzuki R, Atsuta Y, Tanaka J.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplant. 巻: 51 ページ: 43-50
  • DOI: 10.1038/bmt.2015.217.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Influence of differently licensed KIR2DL1-positive natural killercells in transplant recipients with acute leukemia: a Japanese national registry study. (2016)
  • 著者名/発表者名: Arima N, Nakamura F, Yabe T, Tanaka J, Fuji S, Ohashi K, Fukuda T, Miyamura K, Iwato K, Eto T, Mori T, Kobayashi N, Hoshino T, Kato C, Kanamori H, Nakamae H, Atsuta Y, Morishima Y, Kanda Y.
  • 雑誌名: BBMT 巻: 22 ページ: 423-431
  • DOI: 10.1016/j.bbmt.2015.09.029.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bone marrow-derived mesenchymal stem cells (JR-031) for steroid-refractory grade III or IV acute graft-versus-host disease: a phase II/III study. (2016)
  • 著者名/発表者名: Muroi K, Miyamura K, Okada M, Yamashita T, Murata M, Ishikawa T, Uike N, Hidaka M, Kobayashi R, Imamura M, Tanaka J, Ohashi K, Taniguchi S, Ikeda T, Eto T, Mori M, Yamaoka M, Ozawa K.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 巻: 103 ページ: 243-250
  • DOI: 10.1007/s12185-015-1915-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparable outcomes between autologous and allogeneic transplant for adult acute myeloid leukemia in first complete remission. (2016)
  • 著者名/発表者名: Mizutani M, Hara M, Fujita H, Aoki J, Kanamori H, Ohashi K, Usuki K, Fukuda T, Chou T, Tanaka J, Atsuta Y, Takami A.
  • 雑誌名: BMT (in press) 巻: NA ページ: NA
  • DOI: 10.1038/bmt.2015.349.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytomegalovirus reactivation in low-grade B-cell lymphoma patients treated with bendamustine. (2016)
  • 著者名/発表者名: Isono N, Imai Y, Watanabe A, Moriya K, Tamura H, Inokuchi K, Asano C, Masuda M, Shimura H, Mitsuhashi K, Kazama H, Sugimori H, Motoji T, Tanaka J
  • 雑誌名: Leukemia and Lymphoma 巻: NA ページ: NA
  • DOI: in press
  • 査読あり
• [学会発表] ractionated ICE with Rituximab Is Safe and Effective for Relapse/Refractory DLBCL Patients with Severe Comorbidities. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tanaka N, Imai Y, Watanabe Y, Mitsuhashi K, Yoshinaga K, Shiseki M, Mori N, Tanaka J.
  • 学会等名: 57th Annual Meeting of American Society of Hematology (ASH)
  • 発表場所: Orlando, USA.
  • 年月日: 2015-12-05 – 2015-12-08
  • 国際学会
• [学会発表] Reduced PLCG1 expression Is Associated with Inferior Survival in Myelodysplastic Syndromes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shiseki M, Ishii1 M, Ohwashi M, Yoshinaga K, Mori N, Tanaka J.
  • 学会等名: 57th Annual Meeting of American Society of Hematology (ASH)
  • 発表場所: Orlando, USA.
  • 年月日: 2015-12-05 – 2015-12-08
  • 国際学会
• [学会発表] Progression to myeloproliferative neoplasmas was associated with mutation of the JAK2 and CALR genes in patients with idiopathic leukocytosis and thrombocytosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori N, Yoshinaga K, Ohwashi M, Shiseki M, Tanaka J.
  • 学会等名: 20th Congressof Europian Hematology Association (EHA)
  • 発表場所: Vienna, Austria.
  • 年月日: 2015-06-11 – 2015-06-14
  • 国際学会
• [学会発表] Allogeneic stem cell transplantation for patients with acute lymphoblastic leukemia who had central nervous system involvement: A study from the adult ALL working group of the JSHCT. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigematsu A, Kako S, Mitsuhashi K, Ohashi K, Uchida N, Fukuda T, Ogawa H, Miyamura K, Sakura T, Nagamura-Inoue T , Morishima Y, Ichinohe T, Atsuta Y, Mizuta S, Tanaka J.
  • 学会等名: 20th Congressof Europian Hematology Association (EHA)
  • 発表場所: Vienna, Austria.
  • 年月日: 2015-06-11 – 2015-06-14
  • 国際学会