関節症における骨融解・骨新生を誘導する新しい分子の同定とiPS細胞による病態解析

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25461491
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 井田 弘明 久留米大学, 医学部, 教授 (60363496)
• 研究分担者: 海江田 信二郎 久留米大学, 医学部, 助教 (20330798)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 遺伝子 / 関節 / 骨破壊 / 次世代シークエンサー

研究概要

関節破壊が進行する疾患のGeneChipアレイを用いてSNPsによるhomozygosity mappingでは、1家系の姉弟において2049遺伝子が候補遺伝子として残った。次世代シークエンサー(5500 SOLiDシークエンサー；Life Technologies社)でデータ取得後、遺伝子を抽出したところ、10遺伝子11か所のみ抽出された。さらに変異の有無をシークエンスで確認したところ、患者で変異のあるホモ、健常兄弟でホモあるいはヘテロである6カ所のミスセンス変異を確認した。変異による蛋白構造変化を予測したところ、probably damagingを示すものが存在した。さらに、6カ所のミスセンス変異もつ候補遺伝子の発現をRT-PCRで確認した。軟骨細胞、骨芽細胞において、5つの候補遺伝子で発現が確認された。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

次世代シークエンサーでピックアップされた候補遺伝子のsiRNAを作成したが、培養細胞(ヒト由来の骨芽細胞、破骨細胞、軟骨細胞)への添加実験ができていない。細胞数の変化、増殖能、アポトーシスの検出を行い、一つの遺伝子へ絞り込む予定である

今後の研究の推進方策

同定された疾患遺伝子がコードする変異蛋白が、骨融解、骨新生を生じるか、ヒト正常培養細胞(骨芽細胞、破骨細胞、軟骨細胞)を使用して確かめる。
遺伝性関節融解症と遺伝性肥大性骨関節症患者からは、iPS細胞を樹立したい。

研究成果

• [雑誌論文] Familial Mediterranean Fever: genotype-phenotype correlations in Japanese patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Migita K, Agematsu K, Yazaki M, Nonaka F, Nakamura A, Toma T, Kishida D,
  • 雑誌名: Medicine(Baltimore) 巻: 93 ページ: 158-164
  • DOI: 10.1097
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful treatment of Schnitzler syndrome with cyclosporine. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakajima K, Takahashi M, Yamamoto M, Takahashi A, Sano S, Kodama H, Arima K,
  • 雑誌名: Int J Dermatol. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1111
  • 査読あり
• [雑誌論文] The contribution of SAA1 polymorphisms to Familial Mediterranean fever susceptibility in the Japanese population. (2013)
  • 著者名/発表者名: Migita K, Agematsu K, Masumoto J, Ida H, Honda S, Jiuchi Y, Izumi Y, Maeda Y, Uehara R, Nakamura Y, Koga T, Kawakami A, Nakashima M, Fujieda Y, Nonaka F, Eguchi K, Furukawa H, Nakamura T,Nakamura M, Yasunami M.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e55227
  • DOI: 10.1371
  • 査読あり
• [学会発表] 自己炎症性骨疾患である肥大性骨関節症の遺伝子検索 (2013)
  • 著者名/発表者名: 井田弘明、藤川敬太、海江田信二郎、三嶋博之、吉浦孝一郎、右田清志、川上純、福田孝昭．
  • 学会等名: 第34回日本炎症・再生医学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20130702-20130703
• [学会発表] プロテアソーム機能不全症における慢性炎症の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 井田弘明、海江田信二郎、井手元晶子、吉田直実、本多靖洋、福田孝昭．
  • 学会等名: 第57回日本リウマチ学会総会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20130418-20130420