MLL転座型白血病の白血病幹細胞の同定と治療応用に向けての基礎研究

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25461597
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 江口 真理子 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40420781)
• 研究分担者: 石井 榮一 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20176126) ; 江口 峰斉 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (50420782) ; 東山 繁樹 愛媛大学, 学内共同利用施設等, 教授 (60202272)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 小児血液学 / 白血病 / 融合遺伝子

研究実績の概要

Chicken-beta-actin (CAG) プロモーター下にMLL-AF4を発現するマウスES細胞を作製し、免疫不全マウスでの分化実験、腫瘍作製実験に用いた。MLL-AF4を発現するマウスES細胞を未分化造血細胞を含むTie2陽性細胞へ分化させ、免疫不全マウスであるNOGマウスに尾静脈から移植してもマウスは有意な白血病を発症しなかった。MLL-AF4発現ES細胞はマウス体内で優位にリンパ球を含む造血細胞に分化することはなく、MLL-AF4を発現するTie2陽性細胞はむしろ造血細胞への分化が抑制されていると思われた。遺伝子異常の付加による腫瘍化の有無を検討するために、MLL-AF4発現Tie2陽性細胞にレトロウイルスベクター(MSCV)を感染させてランダムな挿入変異を付加した後に、同様にNOGマウスに経静脈的に移植した。その結果白血病の発症は認めなかったが、腎腫瘍の形成を複数のNOGマウスで認めた。これらの腫瘍組織よりDNAを抽出しレトロウイルスの挿入部位を同定した。レトロウイルスの挿入部位の解析により、これらの腫瘍はモノクローナルないしはオリゴクローナルに増殖しており、レトロウイルスの挿入変異により、挿入部位近傍の遺伝子の高発現を生じていることが示された。今後これらの遺伝子の高発現とMLL-AF4の協同作用による腫瘍化についての検討を継続する予定である。
またMLL-AF4陽性の急性リンパ性白血病の細胞株を免疫不全マウスに移植後、ごく早期に骨髄に生着した白血病細胞を回収し、発現アレイ解析により骨髄生着に重要な分子の同定を試みた。ごく早期に骨髄に生着する白血病細胞はTAL1等の幹細胞分画に発現する遺伝子の高発現を認め、より幼若な細胞であると考えられた。骨髄生着に重要な分子として細胞膜蛋白をいくつか同定しており、今後これらの蛋白の機能的な意義づけについて解析を続けていく。

研究成果

• [雑誌論文] HMGA2 as a potential molecular target in KMT2A-AFF1-positive infant acute lymphoblastic leukaemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Wu Z, Eguchi-Ishimae M, Yagi C, Iwabuki H, Gao W, Tauchi H, Inukai T, Sugita K, Ishii E, Eguchi M
  • 雑誌名: Br J Haematol 巻: 171 ページ: 818-829
  • DOI: 10.1111/bjh.13763
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Lineage-dependent skewing of loss of heterozygosity (LOH) of KRAS gene in a case of juvenile myelomonocytic leukemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tokuda K, Eguchi-Ishimae M, Iwabuki H, Kawakami S, Tauchi H, Ishii E, Eguchi M
  • 雑誌名: Eur J Haematol 巻: 94 ページ: 177-181
  • DOI: 10.1111/ejh.12355
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of CD34+ and CD34- leukemia-initiating cells in MLL-rearranged human acute lymphoblastic leukemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Aoki Y, Watanabe T, Saito Y, Kuroki Y, Hijikata A, Takagi M, Tomizawa D, Eguchi M, Eguchi-Ishimae M, Kaneko A, Ono R, Sato K, Suzuki N, Fujiki S, Koh K, Ishii E, Shultz LD, Ohara O, Mizutani S, Ishikawa F
  • 雑誌名: Blood 巻: 125 ページ: 967-980
  • DOI: 10.1182/blood-2014-03-563304
  • 査読あり
• [雑誌論文] DGCR6 at the proximal part of the DiGeorge critical region is involved in conotruncal heart defects. (2015)
  • 著者名/発表者名: Gao W, Higaki T, Eguchi-Ishimae M, Iwabuki H, Wu Z, Yamamoto E, Takata H, Ohta M, Imoto I, Ishii E, Eguchi M
  • 雑誌名: Human Genome Variation 巻: 2 ページ: 15004
  • DOI: 10.1038/hgv.2015.4
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 小児白血病研究の現状と展望―白血病幹細胞を中心として― (2015)
  • 著者名/発表者名: 江口真理子、石前峰斉、石井榮一
  • 雑誌名: 臨床血液 巻: 56 ページ: 1871-1881
  • DOI: 10.11406/rinketsu.56.1871
  • 査読あり
• [学会発表] 非寛解期に臍帯血移植を行った先天性急性単球生白血病の一例 (2015)
  • 著者名/発表者名: 井上真依子、森谷京子、米澤早知子、江口真理子、石前峰斉、田内久道、石井榮一
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] びまん性橋グリオーマ(DIPG)の治療経過中にサイトメガロウイルス感染から血球貪食症候群を発症した1剖検例 (2015)
  • 著者名/発表者名: 久保田真理、田内久道、井上真依子、新田美里、森谷京子、米澤早知子、石前峰斉、江口真理子、石井榮一、倉田美恵、増本純也
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] 単一施設における小児がん患者の死亡例に関する検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 米澤早知子、田内久道、新田美里、森谷京子、石前峰斉、江口真理子、石井榮一
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] Inafnt acute bilineal leukemia with MLL-AF4 fusion gene． (2015)
  • 著者名/発表者名: 石前峰斉、江口真理子、武洲英、森谷京子、米澤早知子、井上真依子、久保田真理、新田美里、手塚優子、田内久道、石井榮一
  • 学会等名: 第77回日本血液学会
  • 発表場所: 石川県金沢市
  • 年月日: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [学会発表] 当科で経験した小児がん経験者の二次がん4症例の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 新田美里、田内久道、米澤早知子、森谷京子、久保田真理、石前峰斉、江口真理子、石井榮一
  • 学会等名: 第118回日本小児科学会
  • 発表場所: 大阪府大阪市
  • 年月日: 2015-04-17 – 2015-04-19