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2013 年度 実施状況報告書

川崎病発症メカニズム解明に対する新たな分子遺伝学的検討

研究課題

研究課題/領域番号 25461629
研究種目

基盤研究(C)

研究機関和歌山県立医科大学

研究代表者

鈴木 啓之  和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (80196865)

研究分担者 吉川 徳茂  和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (10158412)
武内 崇  和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (10246522)
末永 智浩  和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (70433365)
垣本 信幸  和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助教 (90614412)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワード川崎病 / スーパー抗原 / レンサ球菌 / gene transfer
研究概要

本研究では、川崎病において、1)川崎病急性期(入院時)患児の口腔・咽頭ぬぐい液を採取し、液体培地で増菌培養し、増菌した細菌群のDNAおよび同時に増殖し得るphage DNAを抽出し、SAg遺伝子の存在の有無をPCRで検討する。SAg遺伝子の存在が確認された場合、その遺伝子を保有する細菌種を同定する。2) GAS以外の正常菌叢と考えられている常在菌の中に、GAS由来のSAg遺伝子を保有する菌の有無を検討し、保有する細菌種が存在する場合、その細菌種を同定し、川崎病発症に果す役割を明らかにすることが目的である。
本年度は、川崎病診断基準を満たして当院に入院した川崎病患児29例から、入院時時に咽頭ぬぐい液を採取して、液体培地(Brain-Heart Infusion Broth)を用いてovernightで増菌培養し、DNA Mini Kit (QIAGEN)を用いて全DNAを抽出した。その内、9症例例からのDNAを用いて、Borek A.et al.(Polish Journal of Microbiology)の方法によって11種類のスーパー抗原遺伝子(SPe-L, SPe-K, SPe-M, SPe-C, SmeZ, SPeI, ssa, SPeA. SPeH, SPeG, SPeJ)断片についてPCRで検討した。その結果、5例からSAg遺伝子断片が検出された。内訳は、SPeGが2例、SPeLが2例、SPeIが2例、SPeKが1例であった。
現在、これらのSAgについてシークエンスで確認中である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

多種類のSAgを一気に検索できるPCR法を用いているが、PCR反応の条件設定が困難であったため、進行が遅れた。

今後の研究の推進方策

収集できた症例からの全DNAを用いて、上記で得られた好条件のPCR法で多種類のSAg遺伝子分析をできるだけ早く推進していきたい。また、検出されたPCR産物についてシークエンスで確認することも急ぎたい。

次年度の研究費の使用計画

PCRの条件設定に手間取ったため、実験計画が若干遅れたために使用額が計より少なくなりました。
今年度は、昨年の遅れた分の計画に使用する予定である。

  • 研究成果

    (10件)

すべて 2013

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] ITPKC and CASP3 polymorphism and risks for IVIG unresponsiveness and coronary artery lesion formation in Kawasaki disease.2013

    • 著者名/発表者名
      Onouchi Y, Suzuki Y, Suzuki H et al.
    • 雑誌名

      The Pharmacogenomics journal

      巻: 13 ページ: 52-59

    • DOI

      doi: 10.1038/tpj.2011.45.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 川崎病の急性期に突発性発疹を発症した1例2013

    • 著者名/発表者名
      末永智浩、鈴木啓之、垣本信幸、武内 崇、吉川徳茂、渋田昌一
    • 雑誌名

      Prog Med

      巻: 33 ページ: 1458-1460

  • [雑誌論文] 免疫抑制剤シクロスポリンAの有用性2013

    • 著者名/発表者名
      鈴木啓之
    • 雑誌名

      小児科臨床

      巻: 66 ページ: 25-31

  • [雑誌論文] 川崎病の治療2013

    • 著者名/発表者名
      鈴木啓之
    • 雑誌名

      日本臨床

      巻: (増刊号) ページ: 132-136

  • [雑誌論文] 川崎病の診断と治療2013

    • 著者名/発表者名
      鈴木啓之
    • 雑誌名

      医学のあゆみ

      巻: 246 ページ: 27-33

  • [学会発表] 川崎病ガンマグロブリン不応例の地域集積性について2013

    • 著者名/発表者名
      末永智浩、鈴木啓之、垣本信幸、佐藤 匡、武内 崇、吉川徳茂、渋田昌一、大石 興、飯島文憲
    • 学会等名
      第33回日本川崎病研究会
    • 発表場所
      富山
    • 年月日
      20130928-20130929
  • [学会発表] 治療抵抗性川崎病に対するシクロスポリンA療法時の免疫担当細胞のNFAT経路、JAK-STAT経路の関与についての検討2013

    • 著者名/発表者名
      垣本信幸、鈴木啓之、佐藤 匡、末永智浩、武内 崇、渋田昌一、阿部 淳、吉川徳茂
    • 学会等名
      第33回日本川崎病研究会
    • 発表場所
      富山
    • 年月日
      20130928-20130929
  • [学会発表] 川崎病の病名認知度と既往歴認識に関する横断調査成績 -日高地方における喫煙防止のための成人式調査報告-2013

    • 著者名/発表者名
      北野尚美,大谷和正,家永信彦,中井寛明,高辻幹雄,池田明彦,鈴木啓之,竹下達也,日高医師会学校医部会
    • 学会等名
      第33回日本川崎病研究会
    • 発表場所
      富山
    • 年月日
      20130928-20130929
  • [学会発表] シクロスポリンA治療抵抗例に対する3rd-IVIGに関する検討2013

    • 著者名/発表者名
      鈴木啓之、末永智浩、垣本信幸、武内 崇、渋田昌一、吉川徳茂、寺井 勝、濱田洋通、本田 隆文、尾内善広、羽田 明
    • 学会等名
      第49回日本小児循環器学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20130711-20130713
  • [学会発表] 川崎病冠動脈病変遠隔期の光干渉断層法(OCT)を用いた評価2013

    • 著者名/発表者名
      垣本信幸、鈴木啓之、久保隆史、末永智浩、武内 崇、渋田昌一、猪野 靖、赤阪隆史、吉川徳茂
    • 学会等名
      第49回日本小児循環器学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20130711-20130711

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公開日: 2015-05-28  

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