研究課題
本研究の目的は胎児胎盤羊膜系の母児間のクロストークに関わる分子の機能と作用機構の解明である。母児間のクロストークに関わる分子候補であるmidkine (MK)について、これまでの検討の結果からMK局在はvillous trophoblastsの他、extravillous trophoblastsにおける局在も認められた。これらの細胞でのMKの機能は不明でありその手がかりを得るため、絨毛細胞株であるBeWo細胞、JEG-3細胞を用いてMK添加実験、一過性MK発現抑制実験を行い、次世代シークエンサーを用いたRNAseq解析により網羅的解析を行った。BeWo細胞にMK(100ng/uL)を添加した群とコントロール群で2倍以上のRNA量変動があったのはmicro RNAを含む18の遺伝子であり、産物が重金属解毒や抗酸化作用に関わる遺伝子が含まれていた。またJEG-3細胞においてsiRNAによりMK蛋白発現を20％に発現抑制すると、MK発現抑制群とコントロール群で2倍以上のRNA量変動があったのは、MKとmicro RNAを含む11の遺伝子であり、前述のBeWo細胞におけるMK添加実験で2倍以上のRNA量変動を示した二つの遺伝子が含まれ、BeWo細胞実験とRNA量は逆の挙動を示していた。以上のように、trophoblastにおけるMKの機能解明の手がかりとなる基礎的知見が得られた。
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