| 研究課題/領域番号 |
25461851
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 金沢医科大学 |
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研究代表者 |
道合 万里子 金沢医科大学, 医学部, 助教 (40515673)
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| 研究分担者 |
渡邉 直人 金沢医科大学, 医学部, 教授 (40210926)
岩淵 邦芳 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10232696)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | ストロンチウム / γ-H2AX / アポトーシス / 放射線組織障害 / リンパ球 |
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| 研究概要 |
放射性ストロンチウム治療に伴う生体内のリンパ球自体への直接的影響である放射性組織障害に関する検討を対象患者２名に対し血液中のリンパ球を分離し、DNA損傷部位に集積することが知られているγ-H2AXを用いて細胞の免疫染色を行った。γ-H2AX（リン酸化ヒストンタンパク質）とはDNA損傷時の最も早期の細胞応答の一つであるH2AX(ヒストンタンパク質) の139番セリン部位のリン酸化のことをいう。 よって特異的な蛍光標識抗体を用いることで、DNA損傷を視覚的に検出することが可能となる。
DNA損傷部位は核内の点として染色・検出されていることを確認し、光学顕微鏡でDNA損傷の個数を数えた。治療前後の末梢血リンパ球に発生するDNA損傷数の定量測定を正常リンパ球を外部照射してできるDNA損傷数と照射量との関係から求めた標準線より推定した。
また放射性組織障害よって起きうるリンパ球のアポトーシスを評価するために、対象患者２名に対し、治療前後の末梢血リンパ球をTUNEL(TdT-mediatated dUTP-biotin nick end labeling)法にて免疫染色してアポトーシス細胞を定量評価を行った。
アポトーシス細胞を定量評価が可能となることで、リンパ球減少を早期に推定することが可能となる。
γ-H2AX法によるDNA損傷部位の検出や、TUNEL法によるアポトーシスの検出ともに可能であった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
症例数が少ないことが、原因の第一である。
また、治療後の経時的な評価は行えておらず、治療後の通院スケジュールとの調整が
確定できていないことが問題である。
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| 今後の研究の推進方策 |
実験方法としては手技的には確立されてきている。
今後は症例数を増やし、実験の有用性の検証を行っていく。
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