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本研究では、乳癌手術検体または再発乳癌症例の胸水より樹立した乳癌細胞におけるCSCsの機能解析を行い、Luminalタイプ乳癌における薬物療法の位置づけを行うことを目的とした。Ｈ27年度は、本研究で樹立した胸水由来の乳癌初代培養細胞およびLuminalタイプ乳癌細胞株を用いて以下の検討を行った。
4-hydroxytamoxifen(4-OHT)の幹細胞性に対する影響の検討：4-OHT添加mammosphere培養を行った。これにより生成されたmammosphereに対しTAM添加/非添加における多能性遺伝子及びER、FOXA1の発現を比較した。4-OHT添加群においてmammosphere形成数が低下したが、残存し形成されたmammosphereに対する遺伝子発現解析では、4-OHT添加群において多能性遺伝子及びFOXA1遺伝子の高発現が認められた。このことから4-OHT耐性mammosphereがFOXA1を高発現することが示唆された。
FOXA1の幹細胞性への影響の検討：shFOXA1 MCF7 cell及びshControl MCF7 cellを樹立した。これらの細胞を用いてCSCsの自己複製能及び増殖能を評価した。FOXA1 knockdown MCF7 cellを用いた解析では、mammosphere 形成数に差を認めなかったが、colony-formation assayではknockdown cellにおいて明らかなcolony形成低下を認め、mammosphere特異的なFOXA1の過剰発現機序の存在及びcolony-formation assayに反映されるFOXA1依存性CSC増殖能維持が示唆された。
本研究結果より、FOXA1はLuminal type乳癌幹細胞のホルモン耐性及び増殖能に関与している可能性が示唆された。
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