癌微小環境におけるＲｈｏＡ関連蛋白質ＧＣＦ２の発現制御と転移浸潤メカニズムの解析

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25462045
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 大塚 英郎 東北大学, 大学病院, 助教 (50451563)
• 研究分担者: 深瀬 耕二 東北大学, 大学病院, 助教 (00578677) ; 元井 冬彦 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30343057)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: LRRFIP1 / GCF2 / EMT / β-catenin / Wnt / 膵癌

研究実績の概要

GCF2/LRRFIP1(以下、GCF2)は、Actin関連タンパク質Flightless-1と相互作用を有するとされ、細胞骨格調節因子として報告されたタンパク質である。これまでの我々の研究によりGCF2は癌細胞の浸潤・転移に重要な機能を有していることが明らかになりつつある。
本研究では、はじめに癌細胞の上皮間葉移行（EMT）におけるGCF2の関与について検討を行った。膵癌培養細胞株および膵癌切除組織標本において、GCF2とEMTマーカーの発現を検討したところ、E-cadherinとGCF2の間には負の相関が認められた。さらに、SiRNAによりGCF2の発現を抑制した癌細胞株では、E-cadherinの発現が上昇することで、強固な細胞間接着を獲得し、上皮系への形質変化を起こしていた。SnailなどのEMTを制御する転写因子は、GCF2の発現を抑制することでその発現が低下していたが、その機序としてWnt canonical pathwayの抑制によるβ-cateninの核内移行の阻害が考えられた。以上より、GCF2はWnt canonical pathwayのmediatorであるDishevelledとの相互作用を通じて、EMTを制御している可能性が示唆された。なかでもGCF2の発現を抑制することは、癌細胞にReversing EMTを惹起し、浸潤の阻止という点で重要な意義を有していると考えられた。これらの成果は、英文誌にて発表した。（Douchi D, et al. Cancer Letters. 2015)
さらに、膵癌細胞における抗がん剤、とくにGemcitabine感受性について検討を行った。GCF2の発現を抑制した癌細胞では、Gemcitabineの感受性が上昇することが示されたが、その機序としてJNK/c-Junの活性化が関与していることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Silencing of LRRFIP1 reverses the epithelial-mesenchymal transition via inhibition of the Wnt/β-catenin signaling pathway. (2015)
  • 著者名/発表者名: Douchi D, Ohtsuka H, Ariake K, Masuda K, Kawasaki S, Kawaguchi K, Fukase K, Oikawa M, Motoi F, Naitoh T, Katayose Y, Egawa S, Unno M.
  • 雑誌名: Cancer Letters 巻: 365 (1) ページ: 132- 140
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2015.05.023.
  • 査読あり / 謝辞記載あり