KRAS/BRAF変異大腸癌に対するマイクロRNAを利用した新規治療法の開発

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25462057
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 田澤 大 岡山大学, 大学病院, 助教 (90415513)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: マイクロRNA / 大腸癌 / KRAS / BRAF / EGFR

研究実績の概要

本研究では、KRAS/BRAF変異型大腸癌の治療抵抗性におけるEGFRシグナルの活性化を検証し、EGFRシグナル抑制性マイクロRNAを誘導するウイルス製剤を用いた新しい治療法の開発を目指す事を目的とした。

平成27年度は、KRAS/BRAF正常型大腸癌細胞株、KRAS変異型大腸癌細胞株、BRAF変異型大腸癌細胞株に対する2種類の腫瘍融解アデノウイルス製剤OBP-301、OBP-702のEGFR-KRAS/BRAF-ERKシグナルに対する抑制効果をウェスタンブロット法で検証した。OBP-301はKRAS/BRAF正常型大腸癌細胞株とKRAS変異型大腸癌細胞株におけるEGFR-KRAS-ERKシグナルの抑制を示したが、BRAF変異型大腸癌細胞株のEGFR-BRAF-ERKシグナルの抑制を示さなかった。一方、p53発現誘導能を有するOBP-702は全ての細胞株においてEGFR-KRAS/BRAF-ERKシグナルの抑制を示した。次に、OBP-301が誘導するマイクロRNA-7とOBP-702が誘導するマイクロRNA-34がKRAS/BRAF変異型大腸癌細胞の生存率に対する抑制効果を検討した。マイクロRNA-7はKRAS変異型大腸癌の生存率を低下させ、マイクロRNA-34はBRAF変異型大腸癌細胞の生存率を低下させた。以上の結果から、KRAS/BRAF正常型大腸癌細胞やKRAS変異型大腸癌細胞に対して、腫瘍融解アデノウイルス製剤OBP-301はマイクロRNA-7によるEGFR-KRAS-ERKシグナルの抑制を介して抗腫瘍効果を示す事が示唆された。一方、BRAF変異型大腸癌細胞に対して、p53発現誘導能を有する腫瘍融解アデノウイルス製剤OBP-702はマイクロRNA-34によるEGFR-BRAF-ERKシグナルの抑制を介して抗腫瘍効果を示す可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Biological ablation of sentinel lymph node metastasis in submucosally invaded early gastrointestinal cancer (2015)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi S, Kishimoto H, Tazawa H, Hashimoto Y, Kuroda S, Nishizaki M, Nagasaka T, Shirakawa Y, Kagawa S, Urata Y, Hoffman RM, Fujiwara T
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: 23 ページ: 501-509
  • DOI: 10.1038/mt.2014.244.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Fluorescence virus-guided capturing system of human colorectal circulating tumor cells for non-invasive companion diagnostics (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigeyasu K, Tazawa H, Hashimoto Y, Mori Y, Nishizaki M, Kishimoto H, Nagasaka T, Kuroda S, Urata Y, Goel A, Kagawa S, Fujiwara T
  • 雑誌名: Gut 巻: 64 ページ: 627-635
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2014-306957.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Viral transduction of HER2-extracellular domain expands trastuzumab-based photoimmunotherapy for HER2 negative breast cancer cells (2015)
  • 著者名/発表者名: Shimoyama K, Kagawa S, Ishida M, Watanabe M, Noma K, Takehara K, Tazawa H, Hashimoto Y, Matsuoka J, Kobayashi H, Fujiwara T
  • 雑誌名: Breast Cancer Res Treat 巻: 149 ページ: 597-605
  • DOI: 10.1007/s10549-015-3265-y.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Cancer cells mimic in vivo spatial-temporal cell-cycle phase distribution and chemosensitivity in 3-dimensional gelfoam histoculture but not 2-dimensional culture as visualized with real-time FUCCI imaging (2015)
  • 著者名/発表者名: Yano S, Miwa S, Mii S, Hiroshima Y, Uehara F, Kishimoto H, Tazawa H, Zhao M, Bouvet M, Fujiwara T, Hoffman RM
  • 雑誌名: Cell Cycle 巻: 14 ページ: 808-819
  • DOI: 10.1080/15384101.2014.1000685
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Experimental curative fluorescence-guided surgery of highly-invasive glioblastoma multiforme selectively labeled with a killer-reporter adenovirus (2015)
  • 著者名/発表者名: Yano S, Miwa S, Kishimoto H, Toneri M, Hiroshima Y, Yamamoto M, Bouvet M, Urata Y, Tazawa H, Kagawa S, Fujiwara T, Hoffman RM
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: 23 ページ: 1182-1188
  • DOI: 10.1038/mt.2015.63.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Targeting tumors with a killer-reporter adenovirus for curative fluorescence-guided surgery of soft-tissue sarcoma (2015)
  • 著者名/発表者名: Yano S, Miwa S, Kishimoto H, Uehara F, Tazawa H, Toneri M, Hiroshima Y, Yamamoto M, Urata Y, Kagawa S, Bouvet M, Fujiwara T
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 6 ページ: 13133-13148
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Color-coding cancer and stromal cells with genetic reporters in a patient-derived orthotopic xenograft (PDOX) model of pancreatic cancer enhances fluorescence-guided surgery (2015)
  • 著者名/発表者名: Yano S, Hiroshima Y, Maawy A, Kishimoto H, Suetsugu A, Miwa S, Toneri M, Yamamoto M, Katz M, Fleming J, Urata Y, Tazawa H, Kagawa S, Bouvet M, Fujiwara T
  • 雑誌名: Cancer Gene Ther 巻: 22 ページ: 344-350
  • DOI: 10.1038/cgt.2015.26.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Genetic and epigenetic alterations of netrin-1 receptors in gastric cancer with chromosomal instability (2015)
  • 著者名/発表者名: Toda K, Nagasaka T, Umeda Y, Tanaka T, Kawai T, Fuji T, Taniguchi F, Yasui K, Kubota N, Takehara Y, Tazawa H, Kagawa S, Sun DS, Nishida N, Goel A, Fujiwara T
  • 雑誌名: Clin Epigenetics 巻: 7 ページ: 73
  • DOI: 10.1186/s13148-015-0096-y.
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] KRAS/BRAF変異を持つ大腸癌に対する新たな腫瘍融解ウイルス療法の開発 (2015)
  • 著者名/発表者名: 田村周太、田澤 大、堀 直人、國府島 健、菊地覚次、黒田新士、岸本浩行、永坂岳司、西崎正彦、浦田泰生、香川俊輔、藤原俊義
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [学会発表] Preclinical evaluation of tumor-specific oncolytic virotherapy against human colorectal cancer cells with different KRAS/BRAF mutation and microsatellite stability (2015)
  • 著者名/発表者名: Tamura S, Tazawa H, Hori N, Koujima T, Kikuchi S, Kuroda S, Kishimoto H, Nagasaka T, Nishizaki M, Urata Y, Kagawa S, Fujiwara T
  • 学会等名: 第21回日本遺伝子治療学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2015-07-24 – 2015-07-26
• [学会発表] Companion diagnostics-based telomerase-specific oncolytic virotherapy: preclinical evaluation in human colorectal cancer cell lines differentially affected in the RAS/RAF/MEK signaling pathway (2015)
  • 著者名/発表者名: Tamura S, Tazawa H, Hori N, Koujima T, Kikuchi S, Kuroda S, Kishimoto H, Nagasaka T, Nishizaki M, Urata Y, Kagawa S, Fujiwara T
  • 学会等名: 106th Annual Meeting of the American Association for Cancer Research
  • 発表場所: Philadelphia, USA
  • 年月日: 2015-04-18 – 2015-04-22
  • 国際学会