変異型イソクエン酸デヒドロゲナーゼの分子生物学的解析とその臨床応用

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25462242
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 加藤 幸成 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00571811)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: IDH / IDH1-R132H / モノクローナル抗体 / glioma / HMab-2

研究実績の概要

イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（IDH）1/2は、low grade gliomaにおいて高頻度に変異が生じ、α-ケトグルタル酸を2-ヒドロキシグルタル酸(D2-HG)に変換する。一方、野生型IDH1/2と比べ、変異型IDH1/2を保持するgliomaの予後は格段に良いため、予後診断マーカーとして注目されている。これまで、変異型IDH1/2を検出する手段としては遺伝子検査が主であるが、本研究ではモノクローナル抗体による診断法の確立を目指している。昨年度までに、複数の変異型IDH1/2に交差反応性を示し、野生型IDH1/2には反応しないマウスモノクローナル抗体のMsMab-1抗体の樹立に成功した。また、我々はこれまで、gliomaで検出されるIDH変異の中で最も多いIDH1-R132Hに対する新規モノクローナル抗体を２クローン作製しているが、特異性は高いものの、感度が足りないことが問題となっていた。そこで、今年度はさらに感度の高い抗IDH1-R132H抗体の作製を試みた。樹立した新規抗IDH1-R132H抗体（クローン：HMab-2）は、以前に開発したクローンHMab-1と比べ、免疫組織染色法やウェスタンブロット法において、１０倍以上の感度であった。HMab-1を使った免疫組織染色法では、1次抗体の反応時間が18時間程度だったのに対し、HMab-2では1時間に短縮でき、病理診断において格段に有用性が上がった。変異型IDHに対する阻害剤の開発が進んでおり、HMab-2がその診断薬として利用できるように、さらに開発を進めて行く予定である。

研究成果

• [雑誌論文] A high-sensitive HMab-2 specifically detects IDH1-R132H, the most common IDH mutation in gliomas (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujii Y, Ogasawara S, Oki H, Liu X, Kaneko MK, Takano S, Kato Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 466 ページ: 733-739
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.09.070
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Specific monoclonal antibodies against IDH1/2 mutations as diagnostic tools for gliomas. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kato Y
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol. 巻: 32 ページ: 3-11
  • DOI: 10.1007/s10014-014-0202-4
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] A novel monoclonal antibody SMab-2 recognizes endogenous IDH2-R172S of chondrosarcoma (2015)
  • 著者名/発表者名: Liu X, Ogasawara S, Kaneko MK, Oki H, Hozumi Y, Goto K, Takagi M, Kato Y.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 459 ページ: 636-642
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.02.162
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Evaluation of IDH1 status in diffusely infiltrating gliomas by immunohistochemistry using anti-mutant and wild type IDH1 antibodies (2015)
  • 著者名/発表者名: Ikota H, Nobusawa S, Arai H, Kato Y, Ishizawa K, Hirose T, Yokoo H.
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol. 巻: 32 ページ: 237-244
  • DOI: 10.1007/s10014-015-0222-8
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Diagnostic advantage of double immunohistochemistry using two mutation-specific anti-IDH antibodies (HMab-1 and MsMab-1) in gliomas. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takano S, Kato Y, Yamamoto T, Liu X, Ishikawa E, Kaneko MK, Ogasawara S, Matsuda M, Noguchi M, Matsumura A.
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol. 巻: 32 ページ: 169-175
  • DOI: 10.1007/s10014-015-0214-8
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 変異型IDHに対する特異的抗体の開発 (2015)
  • 著者名/発表者名: 加藤幸成
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
  • 招待講演
• [学会発表] 新規IDH2抗体による軟骨肉腫におけるIDH2-R172S変異の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 劉 興、小笠原諭、金子美華、大木弘治、加藤幸成
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [備考] 東北大学大学院医学系研究科地域イノベーション分野
  • URL: http://www.med-tohoku-antibody.com/index.htm