• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2013 年度 実施状況報告書

脊髄損傷時における移植骨髄幹細胞と脊髄組織の相互作用の解明

研究課題

研究課題/領域番号 25462309
研究機関昭和大学

研究代表者

平泉 裕  昭和大学, 医学部, 客員教授 (10255870)

研究分担者 大滝 博和  昭和大学, 医学部, 助教 (20349062)
徐 枝芳  昭和大学, 薬学部, ポストドクタ- (60646298)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
キーワード脊髄損傷 / 骨髄間葉系幹細胞
研究概要

本年度は脊髄損傷に対するヒト骨髄間葉系幹細胞(hMSCs)の有効性の解明を行うためにマウスの脊髄損傷モデルを作成しhMSCsの脊髄内移植を行った。脊髄損傷はC57/BL6系マウスの11および12胸髄の椎間をナイフで切断することにより作成した。hMSCsは損傷部位より一椎体尾側の椎間から損傷1日後にhMSCs (1x10^5個)投与した。一部の細胞は赤色蛍光色素であるPKH26をラベルし細胞の挙動を組織学的に検討した。さらに細胞の組織内残存数をヒトAlu遺伝子のゲノムPCRにより定量した。
脊髄損傷を起こしたマウスは下肢の運動機能障害を起こしマウスの運動機能評価スコア(バソマウススケールBMS)で1.5ポイントを示した。脊髄損傷1日後,hMSCsを医あ移植したところ移植後7日以内に,細胞を移植したマウスは対照群に比べ有意なBMSの改善を認めた。さらにこれらのマウスの脊髄損傷領域をクリア瘢痕として調べると,グリア瘢痕は有意な縮小を認めた。同様の実験を凍結融解により細胞を変性させたhMSCsにより検討するとBMSの改善と損傷領域の改善は全く認められなかった。hMSCsの挙動をPKH26ラベルした細胞にて行うとはhMSCsは移植直後には移植部位のみに認められたが移植7日後には脊髄損傷領域への遊走していることが明らかとなった。しかし,ヒトAlu遺伝子の解析により細胞数は7日で移植直後の1%さらに14日で0.01%と著減した。今後作用機序の解明を試みる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

今年度は,脊髄損傷モデルに対するhMSCsの有用性およびその挙動を検討した。その結果hMSCsの脊髄損傷に対する有用性が確認でき順調に解析が進んでいると考えられる。次年度にこれらhMSCsの細胞死抑制機構の解明を行うための下準備ができた。現在,近年申請者らのグループが見出しhMSCsの神経ペプチドPACAP制御をベースとした解析を行いたい。

今後の研究の推進方策

次年度は,昨年度得られたhMSCsの脊髄損傷に対する保護効果をもとにその機構の解明に取り組む。本年度の結果は,変性させたhMSCsは細胞死抑制作用がなくなることが見出されている。この結果はhMSCsとレシピエントの組織の相互作用が細胞死の抑制に重要であることが考えられる。この点を踏まえて次年度は研究を進める。特に神経ペプチドのPACAPがこの作用に関与している可能性を見出しているのでPACAP遺伝子欠損マウスを用いてhMSCsの移植およびサイトカインなどのELISAを試みる予定である。

次年度の研究費の使用計画

2月-3月に消耗費として物品費として購入した試薬・備品があるが年度末の関係上,決算できなかった。さらに3月末に行われた学会の決算が報告書の作成上決算できなかったためであり,実質未使用分はほとんどない。
次年度は生化学的検討や分子生物学的検討をする予定であり,本年度より物品費が増えることが予想されている。さらに,本年度得られた結果を国内外の学会へ報告する予定である。

  • 研究成果

    (20件)

すべて 2014 2013 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (12件) (うち招待講演 3件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Panax notoginseng saponins alleviate the cerebral edema of rats with intracerebral hemorrhage via coagulation cascade pathway.2014

    • 著者名/発表者名
      Zhao X, Chen Z, Gao F, Xu Z.
    • 雑誌名

      Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine

      巻: 21 ページ: 46-48

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 請求者側からみた脊椎外科診療報酬請求上の問題点.2013

    • 著者名/発表者名
      青田洋一、川上紀明、佐藤勝彦、山縣正庸、遠藤健司、久野木順一、清水敬親、武者芳朗、原田 繁、平泉 裕
    • 雑誌名

      Journal of Spine Research

      巻: 4 ページ: 170-176

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Establishment and characterization of primary adult microglial culture in mice.2013

    • 著者名/発表者名
      Ohtaki H, Tsumuraya T, Song D, Sato A, Ohara K, Miyamoto K, Nakano H, Kiriyama K, Dohi K, Hiraizumi Y, Matsunaga M, Shioda S.
    • 雑誌名

      Acta Neurochir Suppl.

      巻: 118 ページ: 49-54

    • DOI

      doi: 10.1007/978-3-7091-1434-6_8.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The anti-inflammatory property of human bone marrow-derived mesenchymal stem/stromal cells is preserved in late-passage cultures.2013

    • 著者名/発表者名
      Song D, Ohtaki H, Tsumuraya T, Miyamoto K, Shibato J, Rakwal R, Xu Z, Hiraizumi Y, Inoue T, Shioda S.
    • 雑誌名

      J Neuroimmunol

      巻: 263 ページ: 55-63

    • DOI

      doi: 10.1016/j.jneuroim.2013.07.018.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Impact of Panax Notogineseng Saponins on the cerebral edema of rat with coagulation cascade.2013

    • 著者名/発表者名
      Zhao X, Chen Z, Gao F, Xu Z.
    • 雑誌名

      World Chinese Medicine

      巻: 8 ページ: 1335-1337

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The Effect of Early Use of Panax Notoginseng Saponins on Inflammation in Rats with Cerebral Hemorrhage.2013

    • 著者名/発表者名
      Zhao X, Chen Z, Xu Z, Gao F.
    • 雑誌名

      World Chinese Medicine

      巻: 8 ページ: 787-790

    • 査読あり
  • [学会発表] Expression and localization of PACAP specific receptor (PAC1R) in bone marrow of mice2014

    • 著者名/発表者名
      徐 枝芳、大滝 博和、渡邊 潤、宮本 和幸、村井謙允、中町 智哉、平泉 裕、沼澤 聡、塩田 清二
    • 学会等名
      第35回日本炎症・再生医学会
    • 発表場所
      沖縄
    • 年月日
      20140701-20140704
  • [学会発表] Expression and localization of PACAP specific receptor PAC1R in mouse bone marrow2014

    • 著者名/発表者名
      徐 枝芳、大滝 博和、渡邊 潤、宮本 和幸、村井謙允、中町 智哉、平泉 裕、沼澤 聡、塩田 清二
    • 学会等名
      第11回GPCR研究会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140509-20140510
  • [学会発表] Expression of PACAP/VIP and their receptors in the mouse bone marrow2014

    • 著者名/発表者名
      徐枝芳,大滝博和,中町智哉,渡邊潤,宋丹丹,宮本和幸,平泉裕,沼澤聡,塩田清二
    • 学会等名
      第119回日本解剖学会総会・全国学術集会
    • 発表場所
      下野,栃木
    • 年月日
      20140327-20140329
  • [学会発表] 脳虚血刺激によるヒト骨髄間葉系幹細胞の応答2014

    • 著者名/発表者名
      大滝博和,谷口紗季,徐枝芳,渡邊潤,宋丹丹,宮本和幸,塩田 清二
    • 学会等名
      第119回日本解剖学会総会・全国学術集会
    • 発表場所
      下野,栃木
    • 年月日
      20140327-20140329
  • [学会発表] Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells suppressed classical activation of microglial cells2013

    • 著者名/発表者名
      Ohtaki H, Song D, Xu Z, Miyamoto K, Shibato J, Rakwal R, Dohi K, Hiraizumi Y, Shioda S
    • 学会等名
      Neuroscience meeting SFN2013
    • 発表場所
      San Diego, CA
    • 年月日
      20131109-20131113
  • [学会発表] Human stem/progenitor cells from bone marrow improve spinal cord injury via communicating with PACAP.2013

    • 著者名/発表者名
      Ohtaki H, Tsumuraya T, Song D, Sato A, Xu Z, Miyamoto K, Hiraizumi Y, Nakamachi T, Hashimoto H, Shintani N, Shioda S
    • 学会等名
      The 11th International Symposium on VIP, PACAP and Related Peptides
    • 発表場所
      Pecs, Hungary
    • 年月日
      20130827-20130831
  • [学会発表] 脊髄損傷マウスにおけるマイクログリア/マクロファージ活性化へのインターロイキン1の関与2013

    • 著者名/発表者名
      佐藤敦,大滝博和,小原賢司,圓谷智海,平泉裕,渥美敬,塩田清二
    • 学会等名
      第86回日本整形外科学会学術総会
    • 発表場所
      広島
    • 年月日
      20130523-20130526
  • [学会発表] 外科保険医療制度の改善について

    • 著者名/発表者名
      平泉 裕
    • 学会等名
      第66回横浜市整形外科医会講演会
    • 発表場所
      横浜
    • 招待講演
  • [学会発表] Advantage of Lateral Position for L5/S1 Interlaminar Approach PELD.

    • 著者名/発表者名
      Hiraizumi Y
    • 学会等名
      The 13th Annual Meeting of the Pacific and Asian Society of the Minimally Invasive Spine Surgery
    • 発表場所
      Miyazaki Japan
  • [学会発表] 運動器疾患に対する加圧トレーニングの臨床応用.

    • 著者名/発表者名
      平泉 裕
    • 学会等名
      第9回日本加圧トレーニング学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 招待講演
  • [学会発表] 骨粗鬆症を伴う腰椎疾患に対する低侵襲治療.

    • 著者名/発表者名
      平泉 裕
    • 学会等名
      福井県整形外科医会手術講演会
    • 発表場所
      福井
    • 招待講演
  • [学会発表] Localization of pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) receptor (PAC1R) in bone marrow of mice

    • 著者名/発表者名
      徐枝芳,大滝博和,中町智哉,渡邊潤,塩田清二
    • 学会等名
      日本解剖学会関東支部第101回学術集会
    • 発表場所
      東京
  • [図書] Neuroanesthesia and Cerebro-Spinal Protection (Hiroyuki Uchino, Kazuo Ushijima, Yukiko Ikeda eds)2014

    • 著者名/発表者名
      Ohtaki H, Shioda S
    • 総ページ数
      8
    • 出版者
      Springer (Tokyo)
  • [図書] 脊椎内視鏡下手術2013

    • 著者名/発表者名
      平泉 裕
    • 総ページ数
      389
    • 出版者
      文光堂

URL: 

公開日: 2015-05-28  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi