| 研究課題/領域番号 |
25462316
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| 研究機関 | 大阪医科大学 |
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研究代表者 |
根尾 昌志 大阪医科大学, 医学部, 教授 (80311736)
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| 研究分担者 |
大槻 周平 大阪医科大学, 医学部, 助教 (20589840)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | ヘパラン硫酸脱硫酸酵素 / Sulf / 椎間板 |
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| 研究概要 |
現在、各週齢のsulf KOマウスとWTマウスを8-10匹ずつ冷凍保存行い、評価サンプルをそろえている状況である。また、パラフィン包埋による組織作成では椎間板の評価が困難であったため、川本法を用いた標本作製の手順を確立できる様に手技の取得を進めていたが、ようやく可能な状態になっている。
また、ヒト椎間板採取については倫理委員会の承認を得て、採取を検討しているが高齢者の椎間板では変性が強いため、染色の個体差がおおきい。今後、もう少し若年者の組織を採取していくとともに、３０症例程度まで検討を進めていく予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
マウス椎間板をパラフィン包埋で組織を作成するよていであったが、組織が固くきれいな椎間板の組織像を得る事が困難であり、川本法による組織作製法に変更したため。
ヒト椎間板採取後の組織染色もおこなっているが、採取時の椎間板はpiece by pieceに摘出するため、変性した高齢者から採取した椎間板を染色した組織の評価が難しい。今後は経皮的椎間板摘出術など症例をしぼって検討をする事を考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
Sulf KO マウスについては順調に繁殖させているので、ヒトの椎間板及び、Sulf KO椎間板の経時的変化を引き続き検討していく。組織染色のテクニックは概ね完成させたので、免疫染色も含めて検討を深めていく。
また２６年度は、予定していた椎間板変性モデルの作成を進めていく。それらをanabolic/ catabolicマーカーの発現変化との比較, mouse椎間板細胞の培養をすすめる。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
組織染色方法に難渋したため、サンプル作成などがあまり進めれなかった。
よって、学会報告など行う事ができず旅費などの経費を使用しなかった。
組織染色法をパラフィン包埋から凍結切片法（川本法）に変更して、当教室でもすでに確立している。
今後は、ヒト並びにマウスの組織切片を作りながら検討を進め、２６年度に予定している細胞や椎間板変性モデルの作成などの研究を進めていく。
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