| 研究課題/領域番号 |
25462448
|
|---|
| 研究機関 | 大阪市立大学 |
|---|
研究代表者 |
西川 精宣 大阪市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20145791)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | 下行性抑制系 / in vivo patch clamp / 脊髄 / トラマドール / デクスメデトミジン / 交感神経 |
|---|
| 研究概要 |
本研究の目的は、神経障害性疼痛の病態を模したChung のラット脊髄神経結紮モデルを用いて、行動学的実験とともに脊髄in vivo patch clamp 法を用いたシナプス応答を解析し、各種鎮痛薬あるいは交感神経遮断がもたらす効果における下行性抑制系の役割を明らかにすることである。
正常ラットでトラマドール5 mg/kgの静注は逃避閾値を有意に上昇させたが、ナロキソン4 μg/kgで前処置すると変化なかった。トラマドール5mg/kgの静注で興奮性シナプス後電流(EPSC)の曲線下面積(charge transfer)は79%に減少し、抑制性シナプス後電流(IPSC)のcharge transferは0.5 mg/kgから15 mg/kgまで用量依存性に増加した。これらの変化はナロキソン4 μg/kgの前処置で抑制された。脊髄に10 μMのトラマドールを還流させてもEPSC, IPSCは変化なかった。Chungモデルを作成し、選択的定量的侵害刺激を再現するために、定量的侵害機械刺激を加えるピンチメーターと定量的侵害熱刺激を加える痛覚計でラットの足底あるいは下腿を刺激し、トラマドールを脊髄くも膜下に投与して検討した。この脊髄in vivo patch clamp studyでは、覚醒下で求めたピンチ刺激、熱刺激による逃避反応閾値より大きい一定の閾上刺激を与えて誘発EPSC、誘発IPSCの変化とトラマドールの影響を検討した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初、選択的なC線維、Aδ線維、Aβ線維刺激を達成するために、Neurometer NS3000を用いる予定であったが、業者取り扱いが中止され入手困難となった。当初の目的を達成するために必要な選択的定量的侵害刺激を再現するための代替装置の探索と特注が必要となり、機器の調達に日時を要し、本来の研究計画に基いた実験の開始が遅れるので、その間は従来のDynamic plantar aesthesiometerを用いた機械刺激での逃避行動閾値のみでの判断となるが、鎮痛薬の作用を検討する予備実験から始めた。まず脊髄in vivo patch clamp法による検討をトラマドールについて行うこととした。年度途中で鋭利な機械刺激による疼痛刺激を再現するピンチメーターと一定の温度上昇速度と設定温度のプラトー時間を設定できる痛覚計（熱刺激）を代替装置として使用する事で本来の目的に準ずる修正研究計画で進行しているが、トラマドールについては現在までに実施できている。下行性のセロトニンニューロン破壊群、ノルアドレナリンニューロン破壊群の検討は行えていないが、従来の痛みに関する脊髄in vivo patch clamp研究は刺激の特異性、定量性に欠け、得られた結果の解釈が非常に困難であったので、刺激条件を揃えてデータの統一性を確保することがこの研究で最も重要な点であり、遅れを生じたものの、研究内容に大幅な変更は生じていない。
|
| 今後の研究の推進方策 |
ピンチメーターと痛覚計を活用する事で定量性のある侵害刺激を再現できるので、今後は研究のスピードアップが期待できると考えている。鎮痛薬の作用検討が一部先行したので、下行性抑制系ニューロン破壊の影響についても検討を加えるが、重要性が高いと思われるノルアドレナリンニューロン破壊群についての検討を優先し、他の鎮痛薬については、既に正常ラットで知見が得られているα2アゴニストの一つデクスメデトミジンを優先させる。最終年度は腰部交感神経節切除処置の影響についても検討する必要があるので、研究期間内に一定の知見が得られるようにすすめてゆくために、群分けを少し簡略化する。
|
| 次年度の研究費の使用計画 |
年度末に購入を意図していた消耗品の単価が残額を上回ったため購入できなかった。
CG－1.5 500本入り電極用ガラス管 外径1.5 mm 長さ 90 mm \29,000 の一部に充当する
|
