播種性癌細胞を検出・分離する新技術の開発とその応用基盤の確立

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25462478
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 植木 英雄 岡山大学, 医学部, 技術専門職員 (90537218)
• 研究分担者: 那須 保友 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (20237572)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 腫瘍 / 細胞検出

研究実績の概要

本研究は癌特異的プロモーター活性を飛躍的に上昇させる新規遺伝子発現システムを用いて、ごくわずかな癌細胞を強力にラベルし、体外で検出する新技術のための基盤的研究である。 改良型TSTAシステムに加えて、さらに新規の癌特異的遺伝子高発現システムSGEが開発され、このシステムについて癌細胞検出に関する有用性を確認することとした。従来のhTERTプロモーターや、hTERT-SGEシステムを使ったGFP遺伝子発現ベクターを作製し、これらをhTERT活性の高い細胞に導入して、遺伝子の発現強度を比較した。その結果、新システムの候補となるものの中で、当該SGEシステムが、癌細胞において目的発現遺伝子の転写活性を最も高めることを確認した。また、ヒトの各種癌細胞および正常細胞での遺伝子の発現を調査し、SGEシステムが癌特異的プロモーター活性を持つことを確認した。
また、浮遊癌細胞の検出実験を、hTERT-SGEシステムによるGFP遺伝子高発現プラスミドを用いて行った。その結果、癌細胞にのみGFP発現が見られ、ごくわずかな癌細胞を検出、識別することが可能であることを確認した。
今年度は、hTERT-SGEシステムの遺伝子発現上昇率と遺伝子を導入する細胞のhTERT活性との相関関係を調べることを目的として、尿路性器癌細胞のtelomerase活性をELISAで測定した。当該システムのhTERT活性依存的な遺伝子発現を確認し、本研究課題の原理的な実現性は実証できたと考える。
今後は、改良型TSTAシステムとともに体外診断法の実用化に向けた実験と、それ以外の応用技術の開発についてもさらに進展を図りたい。

研究成果

• [雑誌論文] Tumor suppressor REIC/DKK-3 and co-chaperone SGTA: Their interaction and roles in the androgen sensitivity (2016)
  • 著者名/発表者名: Ochiai K, Morimatsu M, Kato Y, Ishiguro-Oonuma T, Udagawa C, Rungsuriyawiboon O, Azakami D, Michishita M, Ariyoshi Y, Ueki H, Nasu Y, Kumon H, Watanabe M, Omi T.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 7 ページ: 3283～3296
  • DOI: 10.18632/oncotarget.6488.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A vaccine strategy with multiple prostatic acid phosphatase-fused cytokines for prostate cancer treatment (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujio K, Watanabe M, Ueki H, Li SA, Kinoshita R, Ochiai K, Futami J, Watanabe T, Nasu Y, Kumon H.
  • 雑誌名: Oncology Reports 巻: 33 ページ: 1585～1592
  • DOI: 10.3892/or.2015.3770.
  • 査読あり / オープンアクセス