| 研究課題/領域番号 |
25462638
|
|---|
| 研究機関 | 京都大学 |
|---|
研究代表者 |
喜多 知子 (嶋知子) 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (20362519)
|
|---|
| 研究分担者 |
中川 隆之 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50335270)
本田 晶 国立研究開発法人理化学研究所, その他部局等, 研究員 (50443023) [辞退]
Raj Ladher 国立研究開発法人理化学研究所, その他部局等, その他 (70392173) [辞退]
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | 内耳 / FGFシグナル / 感覚毛 |
|---|
| 研究実績の概要 |
最初に、Case Western Reserve大学Algramam氏よりPcdh15-Tg2742(null)マウスの供与をうけて検討した。その結果、Pcdh15 nullマウスは、wild-typeと比べてFGFR1のstereocilaでの染色像に違いはなかった。また我々が用いている市販のPcdh15抗体は、kinociliaはspecificに染めるが、stereociliaの染色はノンスペの可能性もあり、染色像の観察において注意が必要と考えられた。
次に、Atoh1-cre ERマウスによるconditional KOマウス作製について、R26R-YFPマウスを用いた検討を行った。出生後のベビーマウスにtamoxifenを腹腔内投与した場合、腹腔内から漏出する場合があり、KOの頻度にばらつきが見られた。そこで母マウスに経口ゾンデでtamoxifenを投与したところ、KOの頻度のばらつきは減った。また投与日数を１日から２日にすることにより、KOされる有毛細胞の比率は７０％となった。しかしながら、１００％でないため、KOされた細胞とKOされていない細胞を区別するのにR26R-YFPマウスを同時使用する必要性があった。それにより（緑：KOの区別、赤：stereociliaは固定されるので）、追加で染色できる分子が１つに限られることとなり、本実験でのこのAtoh1-cre ERマウスの使用の限界が認識された。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究分担者の所属ラボ（理化学研究所ＣＤＢ・感覚発生研究室）の閉鎖・移転に伴い、実験の進行が大幅に遅れた。
|
| 今後の研究の推進方策 |
昨年度の検討からAtoh1-cre ERマウスは使用が限られるので、今後の検討はSix1-creマウスで行う。あと残り１年なので、分子の相互作用に関する検討を進めたい。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
共同研究先のラボの閉鎖・移転（海外）に伴い、使用予定経費の消費が減ったため。
|
| 次年度使用額の使用計画 |
本年度にやり残した事柄について検討する。すなわち、Six1-creを用いたマウスの解析ならびに、FGFR1の分子間相互作用に関するin vitro検討をメインに行う。
|
