網膜色素変性に対する分子遺伝学的研究

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25462738
• 研究機関: 東京慈恵会医科大学
• 研究代表者: 林 孝彰 東京慈恵会医科大学, 医学部, 准教授 (10297418)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 網膜色素変性 / 次世代シークエンサ / 全エクソーム解析 / CNGA1変異 / RPE65変異 / 分子遺伝学 / レーベル先天黒内障

研究実績の概要

本研究では、網膜色素変性とその類縁疾患に対し、候補遺伝子の分子遺伝学的アプローチもしくは次世代シークエンサ(NGS)を用いることにより、原因となる遺伝子変異を検出・特定し、表現型との関連性、ハプロタイプを決定することを目的とした。常染色体優性網膜色素変性の10家系に対し、NGSによる全エクソーム解析法および連鎖解析から、2家系でRHO遺伝子変異(p.W126L, p.A346P)を突き止めp.W126Lが新規変異であることを突き止め、さらにp.W126L変異をもつ変異ロドプシン立体構造について検討した結果、特に明順応下で立体構造転移を示しロドプシン機能障害を引き起こすと考えられた。次に常染色体劣性網膜色素変性の30例・発端者に対して、NGSを用いた全エクソーム解析を行った。その結果、4例でCNGA1変異が検出された。さらに69例でSanger法によるCNGA1遺伝子解析を行ったところ1例で遺伝子変異が検出され、常染色体劣性網膜色素変性全体で5.1% (5/99)がCNGA1遺伝子異常によることが示された。レーベル先天黒内障の遺伝学的特徴を明らかにする目的で、5家系に対して、NGSを用いた全エクソーム解析を行った結果、2例でRPE65変異が検出された。症例1で新規複合ヘテロ接合変異(p.H59Q and p.D62X)が、症例2でホモ接合変異(p.R515W)が検出された。本研究で、3種類のRPE65変異が日本人レーベル先天黒内障の原因となっていることを明らかにした。本研究によって、遺伝子型とその臨床像との関連性の一端を明らかにした。これらの研究成果は、遺伝カウンセリングなどの診療の質を高めるだけでなく、将来の遺伝子補充療法や再生医療など次世代治療の基盤研究に向け有意義なものになると確信する。

研究成果

• [雑誌論文] Closure of a full-thickness macular hole without vitrectomy in choroideremia (2017)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa K, Gekka T, Hayashi T, Kikuchi S, Kameya S, Tsuneoka H
  • 雑誌名: Clin Exp Optom 巻: 100 ページ: 294-295
  • DOI: 10.1111/cxo.12467
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo imaging of a cone mosaic in a patient with achromatopsia associated with a GNAT2 variant (2017)
  • 著者名/発表者名: Ueno S, Nakanishi A, Kominami T, Ito Y, Hayashi T, Yoshitake K, Kawamura Y, Tsunoda K, Iwata T, Terasaki H
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol. 2017 巻: 61 ページ: 92-98
  • DOI: 10.1007/s10384-016-0484-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differences in ocular findings in two siblings: one with complete and other with incomplete achromatopsia (2017)
  • 著者名/発表者名: Ueno S, Nakanishi A, Sayo A, Kominami T, Ito Y, Hayashi T, Tsunoda K, Iwata T, Terasaki H
  • 雑誌名: Doc Ophthalmol 巻: 134 ページ: 141-147
  • DOI: 10.1007/s10633-017-9577-y
  • 査読あり
• [雑誌論文] Foveal Hypoplasia in Patients with Stickler Syndrome (2017)
  • 著者名/発表者名: Matsushita I, Nagata T, Hayashi T, Kimoto K, Kubota T, Ohji M, Kusaka S, Kondo H.
  • 雑誌名: Ophthalmology 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1016/j.ophtha.2017.01.046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel C8orf37 mutations in patients with early-onset retinal dystrophy，macular atrophy，cataracts，and high myopia (2016)
  • 著者名/発表者名: Katagiri S，Hayashi T，Yoshitake K，Akahori M，Ikeo K，Gekka T，Tsuneoka H, Iwata T
  • 雑誌名: Ophthalmic Genet 巻: 37 ページ: 68-75
  • DOI: 10.3109/13816810.2014.949380
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] RPE65 mutations in two Japanese families with Leber congenital amaurosis (2016)
  • 著者名/発表者名: Katagiri S，Hayashi T，Kondo M，Tsukitome H，Yoshitake K，Akahori M，Ikeo K, Tsuneoka H, Iwata T
  • 雑誌名: Ophthalmic Genet 巻: 37 ページ: 161-169
  • DOI: 10.3109/13816810.2014.991931
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Clinical and genetic findings of autosomal recessive bestrophinopathy in Japanese cohort (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi A, Ueno S, Hayashi T, Katagiri S, Kominami T, Ito Y, Gekka T, Masuda Y, Tsuneoka H, Shinoda K, Hirakata A, Inoue M, Fujinami K, Tsunoda K, Iwata T, Terasaki H
  • 雑誌名: Am J Ophthalmol 巻: 168 ページ: 86-94
  • DOI: 10.1016/j.ajo.2016.04.023
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Epidemiology of retinal detachment in patients with Stickler syndrome associated with COL2A1 gene mutations (2016)
  • 著者名/発表者名: Kondo H, Matsushita I, Nagata T, Hayashi T, Kakinoki M, Uchino E, Kondo M, Ohji M, Kusaka S
  • 雑誌名: Hum Genome Var 巻: 3 ページ: 16018
  • DOI: 10.1038/hgv.2016.18
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel heterozygous splice site OPA1 mutation causes exon 10 skipping in Japanese patients with dominant optic atrophy (2016)
  • 著者名/発表者名: Iida K, Ohkuma Y, Hayashi T, Katagiri S, Fujita T, Tsunoda K，Yamada H, Tsuneoka H
  • 雑誌名: Ophthalmic Genet 巻: 37 ページ: 354-356
  • DOI: 10.3109/13816810.2015.1066829
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Novel RP1L1 variants and genotype-photoreceptor microstructural phenotype associations in cohort of Japanese patients with occult macular dystrophy (2016)
  • 著者名/発表者名: Fujinami K, Kameya S, Kikuchi S, Ueno S, Kondo M, Hayashi T, Shinoda K, Machida S, Kuniyoshi K, Kawamura Y, Akahori M, Yoshitake K, Katagiri S, Nakanishi A, Sakuramoto H, Ozawa Y, Tsubota K, Yamaki K, Mizota A, Terasaki H, Miyake Y, Iwata T, Tsunoda K
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 57 ページ: 4837-4846
  • DOI: 10.1167/iovs.16-19670
  • 査読あり
• [雑誌論文] New truncation mutation of NR2E3 gene in patient with enhanced S-cone syndrome (2016)
  • 著者名/発表者名: Kuniyoshi K，Hayashi T，Sakuramoto H，Mishima H, Tsuneoka H，Tsunoda K, Iwata T, Shimomura Y
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 60 ページ: 476-485
  • DOI: 10.1007/s10384-016-0470-0
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Spontaneous resolution of large macular retinoschisis in enhanced S-cone syndrome (2016)
  • 著者名/発表者名: Hayashi T, Gekka T, Tsuneoka H
  • 雑誌名: Ophthalmic Surg Lasers Imaging Retina 巻: 47 ページ: 187-190
  • DOI: 10.3928/23258160-20160126-15
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] High resolution adaptive optics retinal image analysis at early-stage central areolar choroidal dystrophy with PRPH2 mutation (2016)
  • 著者名/発表者名: Gocho K, Akeo K, Itoh N, Kameya S, Hayashi T, Katagiri S, Gekka T, Ohkuma Y, Tsuneoka H, Takahashi H.
  • 雑誌名: Ophthalmic Surg Lasers Imaging Retina 巻: 47 ページ: 1115-1126
  • DOI: 10.3928/23258160-20161130-05
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] OPA1遺伝子欠失を認めた常染色体優性視神経萎縮の家系 (2016)
  • 著者名/発表者名: 林 孝彰
  • 学会等名: 第70回 日本臨床眼科学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2016-11-03 – 2016-11-06
• [学会発表] 網膜色素変性の遺伝子異常と遺伝子解析について (2016)
  • 著者名/発表者名: 林 孝彰
  • 学会等名: 第11回JRPS網脈絡膜変性フォーラム
  • 発表場所: 伊勢
  • 年月日: 2016-10-02 – 2016-10-02
• [学会発表] 家族歴聴取を契機に診断されたS錐体1色覚の1家系 (2016)
  • 著者名/発表者名: 林 孝彰
  • 学会等名: 第64回日本臨床視覚電気生理学会
  • 発表場所: 伊勢志摩
  • 年月日: 2016-09-30 – 2016-10-01
• [学会発表] シンポジウム「診断に苦慮した症例・珍しい症例」眼底に白点がみられた2例 (2016)
  • 著者名/発表者名: 林 孝彰
  • 学会等名: 第64回日本臨床視覚電気生理学会
  • 発表場所: 伊勢志摩
  • 年月日: 2016-09-30 – 2016-10-01
• [学会発表] サブスペシャリティサンデー「小児眼底疾患のアップデート」網膜変性・遺伝性疾患 (2016)
  • 著者名/発表者名: 林 孝彰
  • 学会等名: 120回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2016-04-07 – 2016-04-10
• [学会発表] シンポジウム「遺伝性網脈絡膜変性疾患の遺伝型と臨床型」遺伝性錐体機能不全の遺伝型と臨床型 (2016)
  • 著者名/発表者名: 林 孝彰
  • 学会等名: 120回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2016-04-07 – 2016-04-10