| 研究実績の概要 |
我々は、口腔癌に対する抗癌剤であるシスプラチンの耐性遺伝子の検索を行ってきた。これまでの多くの耐性遺伝子の研究は獲得性耐性遺伝子の検索がほとんどで、実際に臨床応用するには内因性耐性遺伝子の同定が必須であるにも関わらずその研究はあまり行われていない。我々は、これまでシングルセル・クローニング法を用い、口腔癌細胞株SAS細胞からシスプラチンに対する感受性が異なる20種以上の細胞株を樹立した。それぞれのシスプラチン抵抗性をMTS assayにて測定しシスプラチン耐性株2種類と感受性株2種類、計4種の細胞株を選択し以下の実験を行った。
まず、シスプラチン耐性株および感受性株のPTP4A1 mRNAをリアルタイムPCRにて調べたところ、4つの細胞においてPTP4A1 mRNAの発現に有意な差は認められなかった。
次に、JNK, MEL, NF-kB, EGFR, AKT, mTORの各阻害剤を使用してシスプラチンとの併用効果について検討したところ、JNK阻害剤はシスプラチン耐性株および感受性株に対して同程度の殺細胞効果を示し、シスプラチンJNK阻害剤とを併用した実験でも高い併用効果を認めた。耐性株2種類ではJNKの活性が上昇している可能性が考えられたことから、ウェスタンブロッティングにてリン酸化JNKの活性を測定した。予想通り、耐性株2種類では感受性株2種類に比べJNKの活性が非常に高く、シスプラチンで処理した後でもその活性は高く維持されていた。このことからJNKの活性化が、シスプラチン耐性に関与している可能性が考えられ、またJNK阻害剤を併用するとシスプラチン耐性癌でも効果を期待できる可能性が示唆された。
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