研究課題/領域番号 |
25463220
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研究機関 | 長崎大学 |
研究代表者 |
鵜飼 孝 長崎大学, 病院(歯学系), 講師 (20295091)
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研究分担者 |
原 宜興 長崎大学, 医歯学総合研究科(歯学系), 教授 (60159100)
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研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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キーワード | TNFα / 破骨細胞 / RANKL前刺激 |
研究実績の概要 |
咬合性外傷の骨破壊メカニズムは十分に解明されていない。今回の研究では歯周組織におけるRANKL前刺激を受けた破骨細胞前駆細胞の関与に注目した。そこで、in vitroにおいてマウス骨髄マクロファージから破骨細胞を形成させる系を確立した後に、RANKL前刺激が炎症性サイトカインのTNFaによる破骨細胞の分化に与える影響を検討した。RANKL非存在下の状態ではTNFa単独で破骨細胞は形成されるものの、この細胞は吸収能を持たない。しかし、RANKLで24時間の刺激を加えた後ではその後、RANKL非存在下でもTNFaにより、吸収能を持った破骨細胞が形成されることを明らかにした。この研究はArchives of Oral Biologyに掲載された。 現在、RANKL 24時間刺激した骨髄マクロファージの状態を検討中である。これまでの研究でRANKL 24時間後の細胞をFACScanで解析すると、マクロファージのマーカーであるF4/80やCD11bの発現の低下が確認されている。ただし、破骨細胞前駆細胞は付着細胞であり、浮遊している状態では正確なマーカー発現をしていない可能性がある。そこで今後は培養細胞を蛍光免疫染色して各種マーカーの発現状況を確認する予定である。またこの研究結果は平成28年度歯科医学会総会で発表予定である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
RANKL前刺激後の骨髄マクロファージではTNFα刺激で吸収能を持った破骨細胞が形成された。RANKL前刺激を与受けた骨髄マクロファージの状態を解析することが重要と考えた。そこでRANKL刺激を与えた骨髄マクロファージの細胞表面マーカーをFACScanで解析するよう試みたが、十分な結果が得られなかった。
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今後の研究の推進方策 |
細胞医表面のマーカーを検討するにあたり、付着細胞では細胞がプレートに付着している状態で評価することが重要ではないかと考えた。そこで培養細胞の蛍光免疫染色によりマーカーの発現変化を検討することとして、現在進行中である。
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次年度使用額が生じた理由 |
予定した研究が進んでおらず、次年度に研究の継続が必要となったため。
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次年度使用額の使用計画 |
付着細胞の蛍光免疫染色を行うので、その抗体の購入ならびに、成果発表(10月の歯科医学会総会)のために旅費に充てる。
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