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2013 年度 実施状況報告書

齲蝕関連細菌群をターゲットとした歯垢バイオフィルムの多角的解析と齲蝕予防への展開

研究課題

研究課題/領域番号 25463237
研究機関新潟大学

研究代表者

松山 順子  新潟大学, 医歯学系, 助教 (30293236)

研究分担者 佐藤 拓一  東北大学, 歯学研究科(研究院), 講師 (10303132)
鷲尾 純平  東北大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (20400260)
竹中 彰治  新潟大学, 医歯学系, 助教 (50313549)
大島 勇人  新潟大学, 医歯学系, 教授 (70251824)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワード口腔細菌 / 齲蝕 / 小児 / マウス / プラーク / PCRシークエンス法
研究概要

齲蝕発症初期段階の歯垢バイオフィルムでは、細菌の構成割合、代謝産物、pHなどが変化し、バイオフィルムのシフトが起きるといわれている。すなわち、齲蝕病原性の高いバイオフィルムへシフトする前段階で、齲蝕関連細菌群の増加という極めて興味深い動態変化が起きている。本研究では、初期齲蝕発症前段階の歯垢バイオフィルム内で、齲蝕病原性細菌群の増加に先だって、齲蝕関連細菌群が動態変化を起こすことに着目し、齲蝕関連細菌群の量的・質的動態変化を多角的アプローチにより解析することを目的としている。
まずは、口腔内疾患モデルとして使われるゲッ歯類の口腔内プラーク常在菌叢についての網羅的解析を行った。生後3・6週齢および9か月齢のICRマウスを用いて口腔内プラークを採取し、緩衝液に浸漬し、試料とした。分散均一化、希釈後、CDC血液寒天平板に摂取し、嫌気培養後、生育したコロニーから細菌量(CFU)を求めた。さらに16S rRNA PCRシークエンス法によって細菌種を同定し、細菌構成について解析した。
3週齢および6週齢の優勢菌は、それぞれEnterococcus (53%、31%)、Escherichia (19%、26%)、Lactobacillus (17%、21%)、Lactococcus (8.5%、8.3%)であった。一方、9か月齢れは、Lactobacillus (83%)、)、Lactococcus (8.6%)が優勢であった。本研究で、離乳前後および成熟したマウスプラークの細菌構成が、培養とシークエンス解析を組み合わせた生物学的手法によって、明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

齲蝕実験モデルとなる、マウス口腔内プラークの細菌叢について、PCRシークエンス法によって細菌構成を明らかにすることができ、おおむね順調に進展していると考えている。

今後の研究の推進方策

平成25年度までの研究により、齲蝕モデルとしてのマウス口腔内細菌構成を明らかとなったが、今後は、齲蝕発症前後のモデルとしての細菌構成の変化を解析すると同時に、 さらに、ヒトプラークにおける細菌構成についても同様の手法を用いて明らかにしていく。

次年度の研究費の使用計画

研究が年度末にかかり、次年度と連続させて研究計画を継続する必要があるため。
平成25年度と同様に継続して行う。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] 一口量の違いが嚥下までの咀嚼回数および嚥下直前の食塊粒子分布に及ぼす影響2014

    • 著者名/発表者名
      村山直子, 松山順子,三富智恵,坂井幸子,河野承子,佐野富子
    • 雑誌名

      日本咀嚼学会雑誌

      巻: 24 ページ: 印刷中

    • 査読あり
  • [学会発表] Comprehensive analysis of indigenous plaque microbiota of pre- and post-weanling, and grown-up mice2014

    • 著者名/発表者名
      Matsuyama J, Sato T, Quispe-Salcedo A, Mayanagi G, Takahashi N, Ohshima H
    • 学会等名
      The 5th International Symposium for Interface Oral Health Science
    • 発表場所
      Sendai, Japan
    • 年月日
      20140120-20140121
  • [学会発表] 離乳前後および成熟マウスの口腔内プラーク常在菌叢の網羅的解析2013

    • 著者名/発表者名
      松山順子,佐藤拓一,Angela Quispe-Salcedo,高橋信博,大島勇人
    • 学会等名
      第55回歯科基礎医学会学術大会
    • 発表場所
      岡山市
    • 年月日
      20130922-20130922
  • [学会発表] Molecular biological profiling of oral biofilm: Quantitative and qualitative analyses2013

    • 著者名/発表者名
      Sato T, Kawamura Y, Ishida N, Yamaki K, Matsuyama J, Takahashi N
    • 学会等名
      The 2nd IADR-APR (Asia Pacific Region): JADR Mini-Symposium
    • 発表場所
      Bangkok, Thailand
    • 年月日
      20130821-20130821
  • [学会発表] Comprehensive analysis of indigenous plaque microbiota in mice2013

    • 著者名/発表者名
      Matsuyama J, Sato T, Ishimaru H, Muraoka K, Yamashita Y, Quispe-Salcedo A, Mayanagi G, Takahashi N, Ohshima H
    • 学会等名
      The 2nd IADR-APR (Asia Pacific Region)
    • 発表場所
      Bangkok, Thailand
    • 年月日
      20130821-20130821

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公開日: 2015-05-28  

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