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2014 年度 実施状況報告書

細胞質レチノール結合タンパク質によるビタミンA代謝関連酵素活性の調節

研究課題

研究課題/領域番号 25504001
研究機関秋田大学

研究代表者

目崎 喜弘  秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40431621)

研究分担者 妹尾 春樹  秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (90171355)
山口 典子  秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90251553)
吉川 究  秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90400481)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワードビタミンA
研究実績の概要

脂溶性分子であるビタミンAは単独では生体内で安定に存在できないため、その疎水性を緩衝するタンパク質が存在する。細胞外では血漿レチノール結合タンパク質が存在し、細胞内では細胞質レチノール結合タンパク質(CRBP)IおよびIIが存在する。CRBP Iは全身に発現しており、CRBP IIは小腸特異的に発現している。CRBP I/IIはビタミンAの疎水性を緩衝するのみならず、ビタミンAエステル化酵素であるレシチン:レチノールアシルトランスフェラーゼ(LRAT)の酵素活性を正に調節することが示唆されている。LRATを細胞株HEK293に強制発現させると細胞内にレチニルエステルが蓄積することが既に報告されているが、この系にさらにCRBP IIを強制発現して細胞内のレチニルエステル蓄積量をHPLCを用いて定量した。その結果、ビタミンA添加直後のレチニルエステル生成量はCRBP II添加により確かに促進されたが、長時間培養後のレチニルエステル生成量はCRBP IIによりむしろ減少する傾向を示した。長時間培養により過剰に蓄積したレチニルエステルと、CRBP IIによるレチノールの隔離が、LRATの触媒反応に対して抑制的に作用したと考えられた。生体におけるLRAT、CRBP I/IIの発現細胞である肝星細胞や小腸吸収上皮細胞においては、生成したレチニルエステルの隔離機構(脂質滴)、分泌機構(キロミクロン)がそれぞれ発達しているため、LRAT酵素活性が十分に発揮される環境が整えられていると思われる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

ビタミンAエステル化酵素の酵素活性が細胞質レチノール結合タンパク質により促進されることを確認することができたため。

今後の研究の推進方策

ビタミンAエステル化酵素以外のビタミンA代謝関連酵素のcDNAクローニングをさらに進め、活性測定系を構築する。また、精製タンパク質を用いた活性測定系も構築する。

次年度使用額が生じた理由

HPLC分析用試薬の使用量を予定より少なく済ますことができたため。

次年度使用額の使用計画

分子生物学的解析のための消耗品として使用する。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Massive bowel resection upregulates intestinal expressions of cellular retinol-binding protein II and apolipoprotein A-IV mRNAs and alters intestinal vitamin A status in rats.2015

    • 著者名/発表者名
      Hebiguchi T., Mezaki Y., Morii M., Watanabe R., Yoshikawa K., Miura M., Imai K., Senoo H., Yoshino H.
    • 雑誌名

      Int. J. Mol. Med.

      巻: 35(3) ページ: 724-730

    • DOI

      10.3892/ijmm.2015.2066

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] レシチン:レチノールアシルトランスフェラーゼ酵素活性に対する細胞質レチノール結合タンパク質IIの影響2015

    • 著者名/発表者名
      目崎喜弘,蛇口 琢,森井真也子,吉川 究,三浦光隆,今井克幸,吉野裕顕,妹尾春樹
    • 学会等名
      第120回日本解剖学会総会・全国学術集会 第92回日本生理学会大会 合同大会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-03-22 – 2015-03-22
  • [学会発表] 細胞質レチノール結合タンパク質共存下におけるビタミンAエステル化酵素活性の測定2014

    • 著者名/発表者名
      目崎喜弘,蛇口 琢,森井真也子,吉川 究,三浦光隆,今井克幸,吉野裕顕,妹尾春樹
    • 学会等名
      日本ビタミン学会第66回大会
    • 発表場所
      姫路
    • 年月日
      2014-06-13 – 2014-06-13

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公開日: 2016-05-27  

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