間葉系幹細胞の分化スイッチ制御に関わる遺伝子の解析

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25505001
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 赤澤 智宏 東京医科歯科大学, 大学院保険衛生学研究科, 教授 (80291160)
• 研究分担者: 鈴木 喜晴 東京医科歯科大学, 大学院保険衛生学研究科, 准教授 (30596565) ; 馬渕 洋 東京医科歯科大学, 大学院保険衛生学研究科, 助教 (50424172)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 間葉系幹細胞 / 分化指向性

研究実績の概要

本年度は、ヒト間葉系幹細胞における増殖能力とTen-4遺伝子の相関についての解析を行った。これまでの成果により、フローサイトメーターを用いてヒト骨髄細胞より表面抗原マーカーを指標にした分離技術を確立している。分離した間葉系幹細胞は、単一細胞で培養しても増殖し、約 10 継代以上まで増殖することを確認した。また、これらの間葉系幹細胞クローンは、骨・軟骨・脂肪などの間葉系細胞への分化能を持つことが分かった。ヒト間葉系幹細胞の増殖能力が高いクローン（REC）と増殖能力が低いクローン（SEC）を比較した所、増殖能力の高さに応じてTen-4遺伝子の発現が高くなることが分かった。 そこで、ヒト間葉系細胞の分化誘導後におけるTen-4遺伝子の発現についての解析を行うために、骨・軟骨・脂肪に分化させた細胞からRNAを採取し、分化前後での Ten-4 遺伝子発現の比較を試みた。その結果、分化後においてTen-4遺伝子の発現は著しく低下することが確認された。現在、培養方法も変えた条件 (Sphere 培養・無血清培養・低酸素培養)も同様に遺伝子変化を調べている。本年度の研究実績により、マウス間葉系幹細胞に加えヒト間葉系幹細胞においても、幹細胞能力とTen-4の発現に相関関係があるのではないかと考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Purified Human Synovium Mesenchymal Stem Cells as a Good Resource for Cartilage Regeneration. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ogata Y, Mabuchi Y, Yoshida M, Suto EG, Suzuki N, Muneta T, Sekiya I, Akazawa C.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 10(6) ページ: -
  • DOI: 10.1371/journal.pone.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Muscle Satellite Cell Protein Teneurin-4 Regulates Differentiation During Muscle Regeneration. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ishii K, Suzuki N, Mabuchi Y, Ito N, Kikura N, Fukada S, Okano H, Takeda S, Akazawa C.
  • 雑誌名: Stem Cells. 巻: 33(10) ページ: 3017-27
  • DOI: 10.1002/stem.2058.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synovial mesenchymal stem cells promote meniscus regeneration augmented by an autologous Achilles tendon graft in a rat partial meniscus defect model. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ozeki N, Muneta T, Matsuta S, Koga H, Nakagawa Y, Mizuno M, Tsuji K, Mabuchi Y, Akazawa C, Kobayashi E, Saito T, Sekiya I.
  • 雑誌名: Stem Cells. 巻: 33(6) ページ: 1927-38
  • DOI: 10.1002/stem.2030.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Additive dominant effect of a SOX10 mutation underlies a complex phenotype of PCWH. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ito Y, Inoue N, Inoue YU, Nakamura S, Matsuda Y, Inagaki M, Ohkubo T, Asami J, Terakawa YW, Kohsaka S, Goto Y, Akazawa C, Inoue T, Inoue K.
  • 雑誌名: Neurobiol Dis. 巻: 80 ページ: 1-14
  • DOI: 10.1016/j.nbd.2015.04.013.
  • 査読あり
• [学会発表] Purification of human knee synovium-derived mesenchymal stem cells and potency for cartilage regenerative therapy (2015)
  • 著者名/発表者名: Yusuke Ogata, Yo Mabuchi, Mayu Yoshida, Eriko Grace Suto, Nobuharu Suzuki, Takeshi Muneta, Ichiro Sekiya, and Chihiro Akazawa
  • 学会等名: The 10th New York Stem Cell Foundation Annual Meeting
  • 発表場所: New york (USA)
  • 年月日: 2015-10-28 – 2015-10-28
  • 国際学会
• [学会発表] Teneurin-4 is a Regulator of Muscle Stem Cell duruing Muscle Regeneration (2015)
  • 著者名/発表者名: Kana Ishii, Nobuharu Suzuki, Yo Mabuchi, Naomi Kikura, Naoki Ito, Shin’ich Takeda, and Chihiro Akazawa
  • 学会等名: The 10th New York Stem Cell Foundation Annual Meeting
  • 発表場所: New york (USA)
  • 年月日: 2015-10-28 – 2015-10-28
  • 国際学会
• [学会発表] Sox10-Venusマウスを用いたSox10陽性細胞の遺伝子発現解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 赤澤智宏、小栁明日香、馬渕洋、須藤絵里子グレース、鈴木喜晴
  • 学会等名: 第36回日本炎症・再生医学会
  • 発表場所: 虎ノ門ヒルズフォーラム (東京都・港区)
  • 年月日: 2015-07-21 – 2015-07-21
• [学会発表] 組織幹細胞の分化指向性の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 馬渕洋、緒方勇亮、吉田茉由、須藤絵里子グレース、鈴木喜晴、宗田大、関矢一郎、赤澤智宏
  • 学会等名: 第25回日本サイトメトリー学会学術集会
  • 発表場所: ソラシティーカンファレンスセンター（東京都・文京区）
  • 年月日: 2015-07-11 – 2015-07-11
• [備考] http://akazawalab.com/publication/
• [産業財産権] 筋衛生細胞培養用材料および筋衛生細胞の培養法 (2015)
  • 発明者名: 赤澤智宏、鈴木喜晴、馬渕洋、石井佳菜、関矢一郎
  • 権利者名: 赤澤智宏、鈴木喜晴、馬渕洋、石井佳菜、関矢一郎
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2015-216609
  • 出願年月日: 2015-11-04