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本研究の目的は、人工ヌクレアーゼをmtDNAに直接作用可能な遺伝子操作技術を開発することである。そこで、TALEN法を応用し、TALEN cDNAにミトコンドリア移行シグナルとHA-tagなどを付加したミトコンドリア局在型TALENの発現ベクターを構築した。本ベクターで形質転換した培養細胞で免疫染色を行ったところ、TALEN蛋白がミトコンドリアに局在することを確認した。次いで、mtDNA上の標的配列に対する切断効果を検証するために、本ベクターからRNAを合成し、マイクロインジェクション法によってマウス初期胚へ導入したが、現在までに明らかな切断効果は認められておらず、さらなる検討を進めている。。
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