研究課題/領域番号 |
25640115
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研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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研究機関 | 岡山大学 |
研究代表者 |
守屋 央朗 岡山大学, その他部局等, 准教授 (60500808)
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研究分担者 |
紀藤 圭治 明治大学, 農学部, 講師 (40345632)
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研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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キーワード | 酵母 / 過剰発現 |
研究概要 |
本研究では、真核細胞内の各コンパートメントにタンパク質を過剰にしたときに生じる負荷(これを本研究では「プロセス負荷」とよぶ)の原理をあきらかにすることを目的とする。プロセス負荷は、申請者らが独自に開発した遺伝子つなひき(gTOW)法をもちいて、局在化させたGFPの過剰発現の限界を測定することではじめてうまれた概念である。本研究では、プロセス負荷の生じた酵母細胞の生理応答をオミックス解析によりあきらかにし、復帰変異や多コピー抑圧遺伝子の解析により細胞システムがどのようにプロセス負荷を回避するのかをあきらかにする。本研究により、真核細胞における「プロセス負荷」の実体が明らかとなりその概念が確立する。 H25年度は、GFPならびにTEVプロテアーゼをモデルタンパク質として、さまざまな局在化シグナルを付加しこれらの過剰発現の限界を測定するともに、過剰発現を起こしている細胞の生理状態をタイムラプス顕微鏡観察や転写解析により明らかにした。その結果、いくつかの局在化シグナルをもつタンパク質は細胞周期や細胞形態の異常を引き起こすことが明らかとなった。現在これらのデータをまとめて論文発表の準備を進めている。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
概要に示したとおり、細胞の生理状態の解析などがすすでおり、当初の予定通りに進展している。
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今後の研究の推進方策 |
H26年度はこれまでの成果を論文として発表することをまず第一の目標とする。実験についてはH26年度もH25年度に引き続き、モデルタンパク質を過剰発現した場合の生理状態の解析を進めるとともに、その他の局在化シグナルを付加したモデルタンパク質や、ランダムなペプチドを付加したモデルタンパク質の過剰発現の限界の測定を進めていく。
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次年度の研究費の使用計画 |
研究の進捗度合いが当初の予定と若干異なったため、消耗品の使用額に計画との違いが生じた。 H26年度に入り研究の進展があったため、当初の計画とほぼ同じように予算執行がなされると考えている。
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