| 研究実績の概要 |
DNA複製はゲノムの安定な維持継承に必須であり、細胞周期やクロマチン構造によって巧妙に制御されている。複製開始反応では、複製因子がサイクリン依存キナーゼ(CDK)とDbf4依存キナーゼ(DDK)によってリン酸化されることにより、活性化される。よって、キナーゼが付与したリン酸基が除去される場合には複製開始反応が抑制されると考えられる。リン酸基を除去する酵素活性を持つフォスファターゼには、細胞分裂をはじめ多様な反応に必要なフォスファターゼであるPP2A, PP1などが知られているが、複製制御に関与するかどうかは不明であった。本研究において、分裂酵母を用いて、最近開発した植物ホルモンオーキシン添加によりタンパク質を選択的に分解するオーキシンデグロン（AID ; auxin-inducible degradation）系を用いて、G1期あるいはS期に特定フォスファターゼを細胞から完全に除去し、複製とその関連反応への関与を解析した。その結果、PP1は複製タイミング制御に必須であるが、PP2Aは関与しないことが明らかとなった。さらに、近年の解析から複製開始タイミング制御へのテロメア結合因子Taz1, Rif1の関与が示されており、これらの因子とフォスファターゼの関連を解析した結果、Rif1のN末端に存在するPP1結合モチーフに依存してPP1がテロメアに局在することがタイミング制御に重要であることを明らかにした。
|
