研究課題
本研究では、これまでの我々のマウスES細胞での研究で明らかになった、生殖細胞特異的な遺伝子の発現が多能性幹細胞で抑制される分子機構について、動物種を越えて保存されている可能性を検討することを目的とする。そのために、マウスES細胞で生殖細胞特異的遺伝子の発現を抑制するMax, Brg1について、プラナリアおよびニワトリ胚でノックダウン(KD)を行い、生殖細胞特異的遺伝子の発現変化を調べた。プラナリアでのMax-KDについては、調べた6種類の生殖細胞特異的遺伝子のうち、2種類の遺伝子の発現がKDに依存して有意な発現上昇を示すことがわかった。またBrg1-KDでは、この6種類の遺伝子の中でMax-KDの場合とは異なる3種類の遺伝子の発現が有意に上昇した。これらの結果から、プラナリアではマウスES細胞とは異なりMaxは一部の生殖細胞特異的遺伝子の発現抑制に係わっていると考えられた。またニワトリ初期胚の多能性幹細胞であるブラストダーム細胞を培養し、shRNA発現ベクターを導入することによりMax-KDが効率良く起こることを確認した。さらにこの条件でMax-KDを行うと、調べた3種類の生殖細胞特異的遺伝子の中で1つの遺伝子は有意に発現上昇、2番目の遺伝子は上昇傾向、残りの1遺伝子は減少傾向を示すことがわかり、ニワトリにおいてもMax-KDの効果がマウスES細胞とは異なると考えられた。一方、有意に発現上昇した1遺伝子についてタンパクレベルでの発現を免疫染色により調べたところ、発現細胞数が有意に増加することが明らかになり、Max-KDによりより多くの生殖細胞が形成される可能性が示唆された。
すべて 2016 2015
すべて 雑誌論文 (6件) (うち国際共著 1件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (9件) (うち国際学会 1件、 招待講演 2件)
Nature Communications
巻: 7 ページ: 11056
10.1038/ncomms11056
Stem Cells
巻: 33 ページ: 289-300
10.1002/stem.1853
Biochemical and Biophysical Research Communications
巻: 462 ページ: 332-338
10.1016/j.bbrc.2015.04.137
FEBS Letters
巻: 589 ページ: 2754-2762
org/10.1016/j.febslet.2015.07.050
PLoS ONE
巻: 10 ページ: e0144836
10.1371/journal.pone.0144836
Mechanisms of Development
巻: 139 ページ: 1-9
org/10.1016/j.mod.2016.02.001