• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2013 年度 実施状況報告書

フラビウイルス脳炎重症化機序のin vivo分子イメージング解析

研究課題

研究課題/領域番号 25660229
研究種目

挑戦的萌芽研究

研究機関長崎大学

研究代表者

早坂 大輔  長崎大学, 熱帯医学研究所, 助教 (10346926)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
キーワード日本脳炎ウイルス / 分子イメージング / マウス
研究概要

本研究では、フラビウイルス脳炎の新しい病態解析法の確立を目指して、非侵襲的に生体内の代謝機能を測定できる分子イメージングによる解析を行った。また、PET診断用薬剤に用いる放射性核種である68Gaはサイクロトロンを必要とせずジェネレータシステムにより簡便に製造できるため、その利用価値は極めて高い。そこで、日本脳炎ウイルス感染マウスにおける68-Ga-Citrateの集積と日本脳炎病態との関連をPETイメージングにより調べた。
日本脳炎ウイルスJaTH160株10000PFUをddYマウス(雄、5週齢)に皮下接種し、体重、症状、生死を3週間観察した。感染後、マウス1匹あたり3-4MBqの 68Ga-Citrateを静脈内投与し、3-4時間後にイソフルラン吸入麻酔下でFX3000プレクリニカルイメージングシステム(SII)にて頭部~胸部のPET撮像を行った。
その結果、JaTH160感染マウスでは死に至る個体、発症(体重減少)後回復した個体がみられた。13匹のマウスを用い、生存したのは6匹、死に至ったのは7匹であったが、重症個体では薬剤投与直後に死んだ個体がいたため、致死に関しては68Ga-Citrate投与の影響する個体も考えられた。JaTH160感染および非感染マウスともに、68Ga-Citrateの脳内への顕著な集積は確認されなかった。一方、脊髄では体重減少が大きく発症が確認されたJaTH160感染マウスの68Ga-Citrate集積が非感染マウスの集積にくらべて高い傾向にあった。しかしながら、体重減少が小さく明確な発症が確認されなかった個体では、脊髄への68Ga-Citrate集積は非感染マウスと同程度であった。また、JaTH160感染および非感染マウスともに68Ga-Citrateの肩関節への生理的な集積が観察された。本研究で、68Ga-Citrateが日本脳炎ウイルス感染マウスにおける病態解析に有効であることが示唆されたが、投与量や観察のタイミングをさらに検討する必要ある。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

蛍光蛋白による光イメージングによる解析も行う予定であったが、所属機関における感染動物実験施設の改修があったため、また、遺伝子組換えウイルスの作製が予定通りにうまくできなかったために、予定通りに進めることができなかった。

今後の研究の推進方策

来年度は、今年度の結果を踏まえPETイメージングに用いる薬剤、投与量、マウス、ウイルス株をかえて解析を行う予定である。また、123-Iや99-mTc標識薬剤を用いたSPECTによるイメージングを行う予定である。
また、蛍光蛋白遺伝子組換え日本脳炎ウイルスを作製し、日本脳炎ウイルス感染マウスを用いた光イメージングを検討する。

次年度の研究費の使用計画

蛍光蛋白による光イメージングによる解析も行う予定であったが、所属機関における感染動物実験施設の改修、また、蛍光蛋白遺伝子組換えウイルスの作製が予定通りにうまくできなかったため。
次年度は、蛍光蛋白遺伝子組換え日本脳炎ウイルスを作製し、日本脳炎ウイルス感染マウスを用いた光イメージングを検討する。また、PETイメージングに用いる薬剤、投与量、マウス、ウイルス株をかえた解析、123-Iや99-mTc標識薬剤を用いたSPECTによるイメージングを行う予定である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2014 2013 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Pathologic Potential of Variant Clones of the Oshima Strain of Far-Eastern Subtype Tick-Borne Encephalitis Virus2014

    • 著者名/発表者名
      Le Xuan Luat, Mya Myat Ngwe Tun, Corazon C. Buerano, Kotaro Aoki, Kouichi Morita, Daisuke Hayasaka
    • 雑誌名

      Tropical Medicine and Health

      巻: 42 ページ: 15-23

    • DOI

      10.2149/tmh.2013-27

    • 査読あり
  • [雑誌論文] TNF-α acts as an immunoregulator in the mouse brain by reducing the incidence of severe disease following Japanese encephalitis virus infection2013

    • 著者名/発表者名
      Daisuke Hayasaka, Kenji Shirai, Kotaro Aoki, Noriyo Nagata, Dash Sima Simantini, Kazutaka Kitaura, Yuki Takamatsu, Ernest Gould, Ryuji Suzuki, Kouichi Morita
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 8(8) ページ: 1-18

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0071643.

    • 査読あり
  • [学会発表] フラビウイルスの分子イメージング

    • 著者名/発表者名
      早坂大輔、淵上剛志、森田公一
    • 学会等名
      第48回日本脳炎ウイルス生態学研究会
    • 発表場所
      熱海市、ニューウェルシティ湯河原、神奈川県
  • [学会発表] フラビウイルス脳炎の分子イメージング

    • 著者名/発表者名
      早坂大輔、淵上剛志、森田公一
    • 学会等名
      第156回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      岐阜市、岐阜大学、岐阜県

URL: 

公開日: 2015-05-28  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi