| 研究課題/領域番号 |
25670038
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
新谷 紀人 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (10335367)
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| 研究分担者 |
笠井 淳司 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 助教 (40454649)
馬場 明道 兵庫医療大学, その他部局等, その他 (70107100)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | ミトコンドリア / 脳･神経 / 細胞死 / 化合物スクリーニング / ルシフェラーゼ / 酸化ストレス |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、ミトコンドリアの融合を阻害する新規因子として代表者らが同定したMitochondrial Fusion Inhibiotor (MiFI, ミトコンドリア融合阻害因子)の神経系細胞における機能解析を通じて、神経の発達/細胞死制御におけるミトコンドリアの融合阻害の意義解明や、神経変性疾患領域におけるMiFIの創薬標的化を目標として実施し、平成26年度は以下の結果を得た。
1. ドパミン性神経細胞株SH-SY5Yを用いた検討から、MiFIの発現抑制によってMPTPで誘発されるマイトファジーや細胞死が抑制されることを見出した。
2. ヒトMiFI遺伝子のプロモーター領域を搭載したルシフェラーゼ発現ベクターを作製し、ヒトHeLa細胞を用いたMiFI発現制御分子のスクリーニング系を構築した。
3. 同系を用いて作用点が既知の化合物2,320種について、mRNA発現解析による妥当性確認を含めた検討行った結果、MiFI発現を誘導あるいは抑制する化合物を16種同定した。
4. これら化合物の作用点から、MiFIと酸化ストレス制御との関連を見出した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究では、MiFIの遺伝子欠損マウスの作製を計画していたが、ターゲティングベクター作製に関するトラブルシューティングの未完了のため、作製が達成できておらず、この点は計画が遅れている。しかしその一方、MiFI発現を制御する化合物を同定するほか、同化合物群の作用機序からMiFIと酸化ストレス制御との関連を示唆できたことは、予測以上の成果と言える。これらを合わせ、全体的には順調に進展していると評価できる。
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| 今後の研究の推進方策 |
すでに１年間の研究機関の延長が承認済みであり、この期間で本研究の達成目標の一つである、遺伝子欠損マウスの作製を完了させる。現在、ターゲティングコンストラクトの変更やベクター構築の他機関への依頼などを検討している。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成２６年度中にMiFIの遺伝子欠損マウスを作製する予定であったが、作製に必要なターゲティングベクターが構築できず、また、そのトラブルシューティングも年度中に完了することができなかったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
ターゲティングコンストラクトの変更やベクター構築の他機関への依頼などを検討し、未使用額を用い、ベクター構築の達成とMiFIの遺伝子欠損マウスの作製を行う。
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