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2013 年度 実施状況報告書

カイコ個体内遺伝子導入による実験モデル生物の開発

研究課題

研究課題/領域番号 25670134
研究種目

挑戦的萌芽研究

研究機関北海道大学

研究代表者

畠山 鎮次  北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (70294973)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
キーワード遺伝学 / 遺伝子 / 昆虫 / タンパク質 / ウイルス
研究概要

機能未知のヒト遺伝子や遺伝子異常が原因とされる疾患を解析する場合、マウスやラットなど哺乳動物の遺伝子改変動物を作製することが従来から行われてきた。近年になり、下等生物からヒトまでのさまざまな生物のゲノム構造(遺伝子配列)が報告され、多くの遺伝子にヒトホモログhomolog(オーソログortholog)が存在することが判明した。したがって、それぞれの遺伝子の解析の際、条件が合った実験生物モデルを選択することが重要となる。カイコ(幼虫:約8 cm、6 g)は個体サイズが成体マウス(5 cm、約25 g)に近いので生化学的および形態学的解析が可能であり、かつショウジョウバエ研究のように遺伝子操作が容易であるので、ヒト疾患モデル生物として利用価値が高い。本申請では、これらの利点に基づき、ヒト遺伝性疾患解析のモデル生物としてカイコを利用するために、汎用性カイコ内遺伝子発現システムを樹立することを進めた。EGFPやDs-RedcDNAをAcNPV系バキュロウイルス発現ベクター系にサブクローニングし、レポーターコンストラクトを作製した。その後、Bac-to-bacバキュロウイルス発現システムを使用して改変バキュロウイルスを作製した。次に九州大学遺伝子資源開発研究センターから分与可能なカイコ系統のうち、AcNPVが感染し発現可能性の高い各種のカイコ系統(d17,系統など)を譲り受け、感染効率を検討した。さらに、目的遺伝子の安定発現カイコの作製に向けて、piggyBac系によるトランスポゾンシステムの発現ベクター及びその改変バキュロウイルスウイルスを作製した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

今年度において、初年度計画していた実験の遂行が概ねできており、来年度は計画通りにさらに研究を発展させる段階にあるから。

今後の研究の推進方策

概ね計画通りに遂行されているので、現在のところ、変更や課題点はない。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2015 2014 2013

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (7件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] The TRIM-FLMN protein TRIM45 directly interacts with RACK1 and negatively regulates PKC-mediated signaling pathway2015

    • 著者名/発表者名
      Sato,T., Takahashi, H., Hatakeyama, S., Iguchi, A. and Ariga, T.
    • 雑誌名

      Oncogene

      巻: 34 ページ: 1280-1291, 2015

    • DOI

      10.1038/onc.2014.68

    • 査読あり
  • [雑誌論文] TRIM29 as a novel prostate basal cell marker for diagnosis of prostate cancer2014

    • 著者名/発表者名
      Kanno, Y., Watanabe, M., Kimura, T., Nonomura, K., Tanaka, S. and Hatakeyama, S.
    • 雑誌名

      Acta Histochem.

      巻: 116 ページ: 708-712

    • DOI

      10.1016/j.acthis.2013.12.009

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 14-3-3 proteins sequester a pool of soluble TRIM32 ubiquitin ligase to repress autoubiquitination and cytoplasmic body formation2013

    • 著者名/発表者名
      Ichimura T, Taoka M, Shoji I, Kato H, Sato T, Hatakeyama S, Isobe T, Hachiya N
    • 雑誌名

      J. Cell Sci.

      巻: 126 ページ: 2014-2016

    • DOI

      10.1242/jcs.122069

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Siglec-15 Regulates Osteoclast Cytoskeletal Organization in Association with Signaling Adaptor DAP122013

    • 著者名/発表者名
      Kameda Y, Takahata M, Komatsu M, Mikuni S, Hatakeyama S, Shimizu T, Angata T, Kinjo M, Minami A, Iwasaki N
    • 雑誌名

      J. Bone Miner. Res.

      巻: 28 ページ: 2463-2475

    • DOI

      10.1002/jbmr.1989

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification of anti-Sez6l2 antibody in a patient with cerebellar ataxia and retinopathy2013

    • 著者名/発表者名
      Yaguchi H, Yabe I, Takahashi H, Okumura F, Takeuchi A, Horiuchi K, Kano T, Kanda A, Saito W, Matsumoto M, Nakayama KI, Hatakeyama S, Sasaki H
    • 雑誌名

      J. Neurol.

      巻: 261 ページ: 224-226

    • DOI

      10.1007/s00415-013-7134-5

    • 査読あり
  • [学会発表] RNF43遺伝子変異によるがん抑制遺伝子からがん遺伝子への機能転換2013

    • 著者名/発表者名
      築山 忠維,福井 彰雅,寺井 小百合,藤岡 容一朗,品田 恵佐,Yamaguchi Terry,大場 雄介,畠山 鎮次
    • 学会等名
      第36回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(神戸)
    • 年月日
      20131203-20131206
  • [学会発表] がん抑制遺伝子RNF43は異なるメカニズムによってWnt/beta-catenin経路とnoncanonical Wnt経路を抑制する2013

    • 著者名/発表者名
      築山忠維、畠山鎮次
    • 学会等名
      第72回日本癌学会学術総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(横浜)
    • 年月日
      20131003-20131005
  • [学会発表] TRIMタンパク質の多彩な機能2013

    • 著者名/発表者名
      畠山鎮次
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(横浜)
    • 年月日
      20130911-20130913
    • 招待講演
  • [学会発表] ATDCはヒストンH2A.Xのリン酸化とヒストンH4のアセチル化を介してDNA日本鎖切断修復を制御する2013

    • 著者名/発表者名
      桝田安志、畠山鎮次
    • 学会等名
      第86回日本生化学会大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(横浜)
    • 年月日
      20130911-20130913
  • [学会発表] Regulation of cellular functions by TRIM proteins2013

    • 著者名/発表者名
      Hatakeyama, S.
    • 学会等名
      The 35th Naito Conference: The Ubiquitin-Protesome System: from Basic Mechanisms to Pathophysiological Roles
    • 発表場所
      シャトレーゼ ガトーキングダム札幌(札幌)
    • 年月日
      20130709-20130712
    • 招待講演
  • [学会発表] Involvement of linear polyubiquitylation in PPARγ transcriptional activity2013

    • 著者名/発表者名
      Watanabe, M., Takayashi, H., Hatakeyama, S.
    • 学会等名
      The 35th Naito Conference: The Ubiquitin-Protesome System: from Basic Mechanisms to Pathophysiological Roles
    • 発表場所
      シャトレーゼ ガトーキングダム札幌(札幌)
    • 年月日
      20130709-20130712
  • [学会発表] Functional analysis of a novel multiprotein complex containing ataxia telangiectasia group D-complementing (ATDC) gene product, TRIM292013

    • 著者名/発表者名
      Masuda, Y., Takahashi, H., Matsumoto, M., Nakayama, K., Hatakeyama, S.
    • 学会等名
      The 35th Naito Conference: The Ubiquitin-Protesome System: from Basic Mechanisms to Pathophysiological Roles
    • 発表場所
      シャトレーゼ ガトーキングダム札幌(札幌)
    • 年月日
      20130709-20130712

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公開日: 2015-05-28  

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