マウス胎児の頭蓋冠から採取した細胞を、骨芽細胞分化培養培地で21日間培養して得た、骨芽細胞培養上清から、神経系細胞に作用を持つ因子を単離した。PC-12細胞を用いて、骨芽細胞培養上清にPC-12細胞の神経突起伸長を誘導する活性を顕微鏡にて観察した。骨芽細胞分化誘導7日、14日、21日で検討した結果、培養上清を濃縮した場合に生理活性を有する濃縮培養上清がえられた。これをMS解析にて分析した結果、多数の分泌因子が同定され、このうち9つの因子が神経細胞に関与する因子であることが分かった。これについて、遺伝子をノックダウンさせたり過剰発現させたりして、培養上清を調整し、活性の有無について検討した。
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