多発性硬化症における新規治療ターゲット分子の探索

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670256
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 粕谷 善俊 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70221877)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 多発性硬化症 / p38 / リン酸化酵素 / EAE

研究実績の概要

野生型（WT）マウスおよび多発性硬化症（MS）の実験モデルであるExperimental Autoimmune Encephalomyelitis（EAE）に対して抵抗性を示すp38α+/-マウス（p38α-/-マウスは胎生致死）を用いて、以下の解析を行った。
１．昨年度に引き続き、p38α+/-マウスおよびWTマウスをMOG35-55抗原で免疫後、頸部、腋下、鼠蹊部リンパ節より抗体ビーズを用いて調製したCD4陽性細胞を培養下でMOGで再刺激し、抽出蛋白を網羅的蛋白リン酸化アレイに供して両genotype間でリン酸化の程度に差が見られる分子の同定を行った。しかしながら、trialごとにシグナルにバラツキが見られ、現時点ではreliableな情報を得るには至っていない。
２．p38α+/-マウスおよびWTマウスをEAEモデルに供し、免疫開始後20日目の第4-6腰髄からRNAサンプルを調製しDNAアレイに供した。特に、リン酸化酵素群に着目して、その発現変動を両genotype間で比較検討したところ、再現性を持って、sphingosine kinase 1、plasminogen activator, urokinase receptor、MAP3K6(Ask2)、Hexokinase3、STK32Aに２倍以上の発現差が認められた。sphingosine kinase 1は、T細胞のrecruitmentに関与しEAEとの密接な関係が示されているため、本解析結果のreasonableな指標になり得ると考えている。
現在、蛋白リン酸化アレイの条件設定の見直しとともに、DNAアレイで発現差の認められたリン酸化酵素について、それらの活性化の程度と脊髄内局在を確認しながら病態関与機構を解析している。

研究成果

• [雑誌論文] p38の機能と阻害剤の動向 (2015)
  • 著者名/発表者名: 粕谷善俊
  • 雑誌名: 日薬理誌（Folia Pharmacol Jpn） 巻: 145 ページ: 21-26
  • DOI: 10.1254/fpj.145.21.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Therapeutic effect of lung mixed culture-derived epithelial cells on lung fibrosis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Fujita T, Umezawa H, Namiki K, Yoshioka K, Hagihara M, Sudo T, Kimura S, Tatsumi K, Kasuya Y.
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 94 ページ: 1247-1259
  • DOI: 10.1038/labinvest.2014.109
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The second Tomoh Masaki award (2013) (2014)
  • 著者名/発表者名: Emoto N, Kasuya Y, Yanagisawa M.
  • 雑誌名: Life Sci 巻: 118 ページ: 87-90
  • DOI: 10.1016/j.lfs.2014.09.001
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 成体海馬由来神経幹細胞の自己複製能・神経分化能におけるp38MAPキナーゼの役割 (2015)
  • 著者名/発表者名: 吉岡健人，並木香奈，須藤龍彦，粕谷善俊
  • 学会等名: 第88回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場 愛知県名古屋市熱田区
  • 年月日: 2015-03-18 – 2015-03-20
• [学会発表] 選択的ETBアンタゴニストによる敗血症モデルマウスの脳への効果 (2015)
  • 著者名/発表者名: 内藤雄介，吉岡健人，巽浩一郎，粕谷善俊
  • 学会等名: 第88回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場 愛知県名古屋市熱田区
  • 年月日: 2015-03-18 – 2015-03-20
• [学会発表] 線維化肺に対して治療能力をもつ新たな肺胞上皮細胞集団 (2015)
  • 著者名/発表者名: 梅澤弘毅，田中健介，藤田哲雄，吉岡健人，巽浩一郎，粕谷善俊
  • 学会等名: 第88回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場 愛知県名古屋市熱田区
  • 年月日: 2015-03-18 – 2015-03-20
• [学会発表] A role of p38 mitogen-activated protein kinase in emphysema induced by cigarette smoke solution and lipopolysaccharide in Mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Amano H, Murata K, Matsunaga H, Tanaka K, Kobayashi T, Ishida J, Fukamizu A, Sugiyama F, Kimura S, Tatsumi K, Kasuya Y.
  • 学会等名: American Thoracic Society (ATS) 2014 International Conference
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-21
• [学会発表] A simple and low-invasive sepsis mouse model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Naito Y, Yoshioka Y, Tanaka K, Matsunaga H, Ishida J, Fukamizu A, Kimura S, Tatsumi K, Kasuya Y.
  • 学会等名: American Thoracic Society (ATS) 2014 International Conference
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-21
• [学会発表] Role of IL-6 signal in the epithelial injury-based mechanisms of lung fibrosis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Tanaka K, Amano H, Fujita T, Kimura S, Tatsumi K, Kasuya Y.
  • 学会等名: American Thoracic Society (ATS) 2014 International Conference
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-21
• [学会発表] Intratracheal administration of ET receptor antagonists suppresses the development of LPS-induced acute lung injury. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujita T, Tanaka K, Tatsumi K, Kimura S, Kasuya Y.
  • 学会等名: American Thoracic Society (ATS) 2014 International Conference
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-21
• [備考] 千葉大学大学院医学研究院分子生体制御学
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/bunsiseitai/index.html
• [産業財産権] 肺障害治療能を有する細胞培養上清液 (2014)
  • 発明者名: 萩原昌彦，粕谷善俊, 田中健介，藤田哲雄
  • 権利者名: 萩原昌彦，粕谷善俊, 田中健介，藤田哲雄
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2014-259827
  • 出願年月日: 2014-12-24
• [産業財産権] 肺サーファクタントタンパク質陽性細胞への分化誘導能を有する細胞培養上清液 (2014)
  • 発明者名: 萩原昌彦，粕谷善俊, 田中健介，藤田哲雄
  • 権利者名: 萩原昌彦，粕谷善俊, 田中健介，藤田哲雄
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2014-259829
  • 出願年月日: 2014-12-24