脂質結合蛋白質を標的にした神経膠腫診断と腫瘍増殖制御の試み

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25670274
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 大和田 祐二 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20292211)
• 研究分担者: 鈴木 倫保 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80196873)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: グリオーマ / FABP / 幹細胞

研究概要

膠芽腫は脳腫瘍の中で最も悪性度が高く、未だに治療が困難である。近年、膠芽腫の再発や予後に、神経膠腫幹細胞（GCS）が関与していることが示唆されている。本申請では、脂肪酸結合タンパク質(FABP)に着目し、膠芽腫およびGCSにおける発現と機能について解析を行っている。本年度得られた主な実績は以下の通りである。
１.グリア細胞由来の悪性腫瘍である膠芽腫におけるFABP7発現について、ヒトグリオーマ株およびグリオーマ幹細胞株を用いた検討を行った。その結果、FABP7は腫瘍分化能を有する幹細胞において有意に高い発現を示し、さらにヒト神経膠腫の悪性度と正の相関を示すことが明らかになった。
２．ヒト膠芽腫では、FABP7とSox2(幹細胞マーカーの一つ）が高い共存関係を示すことを明らかにした。
３．幹細胞株において血清により分化を誘導すると、FABP5は発現が上昇するのに対して、FABP7は、著明な発現低下を示すことを明らかにした。
４.ELISA法により、膠芽腫患者由来の髄液中FABP7量を測定した結果、FABP7は正常髄液に比べ、有意に上昇していることが判明した（投稿準備中）

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

初年度に予定していた膠芽腫幹細胞株における発現検討、および膠芽腫手術標本での免疫組織学的解析を順調に完了し、成果の発表（国内・国際学会での発表、および論文発表）を行った。さらに、幹細胞株への遺伝子導入に関する条件検討も終了し、細胞分裂、腫瘍浸潤等への影響を精査している。実験は、当初の計画通りに進んでいる。

今後の研究の推進方策

計画書通りに鋭意研究を推進する。特にFABP7が膠芽腫の浸潤・増殖に担う役割について、検討するとともに、FABP7測定系を更にブラッシュアップさせることにより、血清中での検出を目指す。

次年度の研究費の使用計画

初代培養への遺伝子導入実験に着手していないため、未使用額が生じているものの、現在実験準備が整いつつある。
次年度は、遺伝子導入実験に関連する細胞培養実験試薬等に平成25年度の未使用額を合算し、研究費を執行する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Pathological features of highly invasive glioma stem cells in a mouse xenograft model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sadahiro, H., Yoshikawa, K., Ideguchi, M., Kajiwara, K., Ishii, A., Ikeda, E., Owada, Y., Yasumoto, Y. and Suzuki, M.
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol 巻: 31 ページ: 77-84
  • DOI: 10.1007/s10014-013-0149-x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in glutamate concentration, glucose metabolism, and cerebral blood flow during focal brain cooling of the epileptogenic cortex in humans. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nomura, S., Fujii, M., Inoue, T., He, Y., Maruta, Y., Koizumi, H., Suehiro, E., Imoto, H., Ishihara, H., Oka, F., Matsumoto, M.,Owada, Y., Yamakawa, T. and Suzuki, M.
  • 雑誌名: Epilepsia. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preservation of cochlear function in Fabp3 (H-Fabp) knockout mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, J., Oshima, T., Yoshida, N., Kimura, R., Takata, Y., Owada, Y., Kobayashi, T. and Osumi, N.
  • 雑誌名: Neurosci Res. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1016/j.neures.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spinal cord ischemia/injury. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa, T., Suzuki, H., Ishikawa, K., Yasuda, S., Matsui, T., Yamamoto, M., Kakeda, T., Yamamoto, S., Owada, Y. and Yaksh, TL.
  • 雑誌名: Curr Pharm Design. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hyperlocomotor activity and stress vulnerability during adulthood induced by social isolation after early weaning are prevented by voluntary running exercise before normal weaning period. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa, J., Ogawa, Y., Owada, Y. and Ishikawa, A.
  • 雑誌名: Behavior Brain Res. 巻: 264 ページ: 197-206
  • DOI: 10.1016/j.bbr.2014.02.007.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of bone marrow-derived vascular progenitor cells in neovascularization during follicular development in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kizuka-Shibuya, F., Tokuda, N., Takagi, K., Adachi, Y., Lee, L., Tamura, I., Maekawa, R., Tamura, H., Suzuki, T., Owada, Y. and Sugino N.
  • 雑誌名: J Ovarian Res. 巻: 7 ページ: 10
  • DOI: 10.1186/1757-2215-7-10.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fatty acid binding protein 7 as a marker for glioma stem cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Morihiro, Y., Yasumoto, Y., Koshy, VL., Sadahiro, H., Uchida, T., Inamura, A., Sharifi, K., Ideguchi, M., Nomura, S., Tokuda, N., Kashiwabara, S., Ishii, A., Ikeda, E., Owada , Y. and Suzuki, M.
  • 雑誌名: Pathol Int. 巻: 63 ページ: 546-553
  • DOI: 10.1111/pin.12109.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential expression and regulatory roles of FABP5 and FABP7 in oligodendrocyte lineage cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sharifi, K., Ebrahimi, M., Kagawa, Y., Islam, A., Tuerxun, T., Yasumoto, Y., Hara, T., Yamamoto, Y., Miyazaki, H., Tokuda, N., Yoshikawa, T. and Owada, Y.
  • 雑誌名: Cell and Tissue Res. 巻: 354 ページ: 683-695
  • DOI: 10.1007/s00441-013-1730-7.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The effect of hypothermia therapy in neonatal mice on the cortical laminar disruption following ischemic injury in neonatal mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kida, H., Nomura, S., Shinoyama, M., Ideguchi, M., Owada, Y. and Suzuki, M.
  • 雑誌名: PLos One. 巻: 8 ページ: e68877
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0068877.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cooling treatment transiently increases the permeability of brain capillary endothelial cells through translocation of claudin-5. (2013)
  • 著者名/発表者名: Inamura, A., Adachi, Y., Inoue, T., He, Y., Tokuda, N., Nawata, T., Shirao, S., Nomura, S., Fujii, M., Ikeda, E., Owada, Y. and Suzuki, M.
  • 雑誌名: Neurochem Res. 巻: 38 ページ: 1641-1647
  • DOI: 10.1007/s11064-013-1066-4.
  • 査読あり
• [学会発表] FABP7 is involved in epigenetic modification in astrocytes.
  • 著者名/発表者名: Kagawa, Y.
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（神戸）
• [学会発表] Fatty acid binding protein 3 (FABP3) regulates cognitive function and anxiety behaviors.
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, Y.
  • 学会等名: Neuroscience 2013
  • 発表場所: San Diego(USA)
• [学会発表] FABP7-deficiency altered membrane lipid raft formation in astrocytes.
  • 著者名/発表者名: Kagawa, Y.
  • 学会等名: Neuroscience 2013
  • 発表場所: San Diego(USA)
• [学会発表] Fatty acid-binding protein 7 (FABP7) regulates lipid raft formation in astrocytes.
  • 著者名/発表者名: Kagawa, Y.
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜）
• [学会発表] 脂肪酸結合タンパク質FABP3欠損マウスにおける認知機能及び情動行動異常の神経機序
  • 著者名/発表者名: 山本由似
  • 学会等名: 第36回日本神経科学大会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都）
• [備考] 山口大学大学院医学系研究科 器官解剖学分野研究室HP
  • URL: http://ds.cc.yamaguchi-u.ac.jp/~org-anat/
• [産業財産権] 難聴が生じにくいモデル動物 (2013)
  • 発明者名: 鈴木淳、大隅典 子、高田雄介、大 和田祐二
  • 権利者名: 東北大学・山口大 学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: PCT/JP2013/074940
  • 出願年月日: 2013-09-13
  • 外国