| 研究課題/領域番号 |
25670277
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| 研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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| 研究機関 | 岐阜医療科学大学 |
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研究代表者 |
中山 章文 岐阜医療科学大学, 保健科学部, 准教授 (70536721)
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| 研究分担者 |
水野 文子 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (70271202)
山本 惠三 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (90254490)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 敗血症 / 大腸菌 / 病原因子 |
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| 研究概要 |
本研究は、敗血症の発症過程として重要な、病原体の血管内侵入、組織および細胞への定着、自然免疫からの回避に関わる種々の因子を、患者の臨床背景によってクラス分類した臨床由来株の分子細菌学的比較解析によって明らかにすることを目的としている。今年度は、大腸菌の既知病原遺伝子17種類について血液由来大腸菌株100株と血液以外の臨床材料から得られた大腸菌株100株における保有率の比較を行い若干の傾向を認めた。また、新規病原因子の検索として新生児髄膜炎由来大腸菌株の全塩基配列の解析をもとにして20種類の候補遺伝子を選定した。更に、この候補遺伝子の血液由来大腸菌株と血液以外の臨床材料および健常者の糞便から分離された大腸菌株における保有率の比較を行っている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究初期段階の目的としている大腸菌の敗血症発症に関わる既知病原因子の解析は順調に進んでいる。また、もう一つの未知病原因子の解析についても新生児髄膜炎由来大腸菌を対象として用いた全遺伝子解析において20種の候補遺伝子が得られており、現在その遺伝子のクラス分類した大腸菌株について保有率の解析を進めており、当初の計画よりやや遅れているものの順調に進行している。
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| 今後の研究の推進方策 |
本研究課題の今後の推進方策については、現在行っている候補遺伝子の解析結果をもとに対象遺伝子がコードしているタンパク質の分析を進めるために、遺伝子のクローニングおよび発現系の構築を速やかに行いたい。また、タンパク質の培養細胞に対する生理活性についての分析も進めていきたい。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
本研究課題を達成するために、候補遺伝子のクローニング・発現を行い、対象遺伝子がコードしているタンパク質の培養細胞に対する生理活性および組換えタンパク質の結晶構造についての分析を進める。
以下の実験項目を順次行う
１．候補遺伝子の大腸菌K-12株へのクローニング。２．組換えタンパク質の発現と精製。３，組換えタンパク質の結晶構造解析。４，組換えタンパク質の細胞培養系での生理活性の分析
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