マイクロRNAの局所徐放システムの構築と生体応用

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670383
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 尾野 亘 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (00359275)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: ステント / 冠動脈 / 血管内皮細胞

研究実績の概要

近年、冠動脈疾患治療には血管平滑筋細胞の増殖抑制作用を持つ薬剤溶出性ステントが用いられている。しかし、これは同時に血管内皮細胞の増殖も抑制するため、血栓症や慢性炎症を引き起こすことが問題となっている。すなわち、理想的な血管治療においては、①治療部位の血管内皮細胞を再生させ、かつ②再狭窄の主体となる平滑筋細胞の増殖を抑制することである。
我々は、これまでに血管内皮細胞を誘導し、抗炎症作用を持つマイクロRNA(miR)-126に着目し研究を行っている。その過程で、このmiR-126が直接血管平滑筋の増殖抑制も起こすことを見出し、上記の①②を同時に満たす最適なマイクロRNAであると判断した。まず、このmiR-126をPLGA（乳酸・グリコール酸共重合体）ナノ粒子に封入し、ステントに電着し、miR126徐放化ステントを作成した。
次に、このステントの効果をウサギの腸骨動脈を用いて検証した。miR-126搭載ステントにおいて、コントロールRNAと比較して、有意に再狭窄予防効果を認めた。実際に局所での血管内皮細胞の再生および、平滑筋細胞の増殖抑制を認めた。この結果により日｢マイクロＲＮＡ溶出型ステント及びそれを用いた管腔治療｣　として特許を出願した（特願2014-044463）。さらにブタ冠動脈モデルでの実験も施行し、現在結果の解析中である。
このシステムにより、複数のマイクロRNAや生理活性物質の徐放化も可能であるため、幅広い研究展開も可能となると考えられる。
冠動脈ステントは現在でも外国の製品が主流である。本研究により、それらを上回る機能（抗血栓性、抗炎症性）を持つ日本発の製品を作り出すことが可能となる。すでに医薬品医療機器総合機構において戦略相談事前面談を行った。フォローアップ面談を受け、さらに臨床研究のプロトコールを確定する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] MicroRNA-33a/b in Lipid Metabolism. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ono K, Horie T, Nishino T, Baba O, Kuwabara Y, Yokode M, Kita T, Kimura T.
  • 雑誌名: Circ J. 巻: 79 ページ: 278-84.
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-14-1252.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Clinical Impact of Left Ventricular Outflow Tract Obstruction in Takotsubo Cardiomyopathy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawaji T, Shiomi H, Morimoto T, Tazaki J, Imai M, Saito N, Makiyama T, Shizuta S, Ono K, Kimura T.
  • 雑誌名: Circ J. 巻: 79 ページ: 839-46
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-14-1148.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] MicroRNA-451 Exacerbates Lipotoxicity in Cardiomyocytes and High-Fat Diet-Induced Cardiac Hypertrophy in Mice through Suppression of the LKB1/AMPK Pathway (2015)
  • 著者名/発表者名: Kuwabara Y, Horie T, Baba O, Watanabe S, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Nakao T, Nishino T, Otsu K, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 雑誌名: Circ Res. 巻: 116 ページ: 279-88
  • DOI: 10.1161/CIRCRESAHA.116.304707.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effect of Statin Therapy on Cardiovascular Outcomes after Coronary Revascularization in Patients ≥80 Years of Age: Observations from Observations from the CREDO-Kyoto Registry Cohort-2. (2014)
  • 著者名/発表者名: Natsuaki M, Morimoto T, Furukawa Y, Shiomi H, Ono K, Kimura T on behalf of the CREDO-Kyoto PCI/CABG resigsty cohort-2 investigators.
  • 雑誌名: Atherosclerosis 巻: 237 ページ: 821-8.
  • DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2014.10.108.
• [雑誌論文] Cardiac-specific inhibition of kinase activity in calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase- leads to accelerated left ventricular remodeling and heart failure after transverse aortic constriction in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe S, Horie T, Nagao K, Kuwabara Y, Baba O, Nishi H, Sowa N, Narazaki M, Matsuda T, Takemura G, Wada H, Hasegawa K, Kimura T, and Ono K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: e108201
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0108201.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effect of Preinfarction Angina Pectoris on Long-term Survival in Patients With ST-Segment Elevation Myocardial Infarction Who Underwent Primary Percutaneous Coronary Intervention. (2014)
  • 著者名/発表者名: Taniguchi T, Shiomi H, Toyota T, Morimoto T, Akao M, Nakatsuma K, Ono K, Makiyama T, Shizuta S, Furukawa Y, Nakagawa Y, Ando K, Kadota K, Horie M, Kimura T.
  • 雑誌名: Am J Cardiol. 巻: 114 ページ: 1179-86
  • DOI: 10.1016/j.amjcard.2014.07.038.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Incidence and Outcome of Surgical Procedures After Coronary Artery Bypass Grafting Compared With Those After Percutaneous Coronary Intervention: A Report From the Coronar Revascularization Demonstrating Outcome Study in Kyoto PCI/CABG Registry Cohort-2. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tokushige A, Shiomi H, Morimoto T, Ono K, Furukawa Y, Nakagawa Y, Kadota K, Ando K, Shizuta S, Tada T, Tazaki J, Kato Y, Hayano M, Abe M, Hamasaki S, Ohishi M, Nakashima H, Mitsudo K, Nobuyoshi M, Kita T, Imoto Y, Sakata R, Okabayashi H, Hanyu M, Shimamoto M, Nishiwaki N, Komiya T, Kimura T
  • 雑誌名: Circ Cardiovasc Interv. 巻: 7 ページ: 482-91.
  • DOI: 10.1161/CIRCINTERVENTIONS.113.001056.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Anticoagulant and antiplatelet therapy in patients with atrial fibrillation undergoing percutaneous coronary intervention. (2014)
  • 著者名/発表者名: Goto K, Natsaki M, Yahata M, Ono K, Kadota K, Takatsu Y, Tamura T,Takizawa A, Inada T, Doi O, Nohara R, Matsuda M, Takeda T, Kato M, Shirotani M, Eizawa H, Ishii K, Lee JD, Takahashi M, Horie M, Takahashi M, Miki S, Aoyama T, Suwa S, Hamasaki S, Ogawa H, Mitsudo K, Nobuyoshi M, Kita T, Kim ra T
  • 雑誌名: Am J Cardiol. 巻: 114 ページ: 70-8.
  • DOI: 10.1016/j.amjcard.2014.03.060.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] MicroRNA-33b knock-in mice for an intron of sterol regulatory element-binding factor 1 (Srebf1) exhibit reduced HDL-C in vivo. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horie T, Nishino T, Baba O, Kuwabara Y, Nakao T, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Nakazeki F, Ide Y, Koyama S, Sowa N, Yahagi N, Shimano H, Nakamura T, Hasegawa K, Kume N, Yokode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 4 ページ: 5312
  • DOI: 10.1038/srep05312.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Long-Term Efficacy and SafetyOutcomes After Unrestricted Use of Drug-Eluting Stents in Patients With AcuteCoronary Syndrome. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawaji T, Shiomi H, Morimoto T, Tamura T, Nishikawa R, Yano M, Tazaki J, Imai M, Saito N, Makiyama T, Shizuta S, Ono K, Kimura T.
  • 雑誌名: Circ J. 巻: 78 ページ: 1628-35
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Evolution in practice patterns and long-term outcomes of coronary revascularization from bare-metal stent era to drug-eluting stent era in Japan. (2014)
  • 著者名/発表者名: Shiomi H, Morimoto T, Makiyama T, Ono K, Furukawa Y, Nakagawa Y, Kadota K, Onodera T, Takatsu Y, Mitsudo K, Kita T, Sakata R, Okabayashi H, Hanyu M, Komiya T, Yamazaki F, Nishiwaki N, Kimura T; CREDO-Kyoto Investigators.
  • 雑誌名: Am J Cardiol. 巻: 113 ページ: 1652-9
  • DOI: doi: 10.1016/j.amjcard.2014.02.037.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] シンポジウム2 高血圧における臓器連関 ｢miR-33a/bによる細胞・臓器レベルの脂質代謝制御機構｣ (2015)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第44回日本心脈管作動物質学会
  • 発表場所: 高松
  • 年月日: 2015-02-07 – 2015-02-07
  • 招待講演
• [学会発表] Microrna-33, Located Within Srebf2 Intron, Regulate Fatty Acid Synthesis via Targeting SREBP-1 in vivo (2014)
  • 著者名/発表者名: 1)Nishino T, Horie T, Baba O, Kuwabara Y, Nakao T, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Ide Y, Nakazeki F, Koyama S, Yokode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: American Heart Association Annual Scientific Sessions 2014
  • 発表場所: Chicago
  • 年月日: 2014-11-15 – 2014-11-19
• [学会発表] MicroRNA-33b Knock-in Mice for an Intron of Sterol Regulatory Element-Binding Factor 1 (Srebf1) Exhibit Reduced HDL-C in vivo (2014)
  • 著者名/発表者名: 2)Horie T, Nishino T, Baba O, Kuwabara Y, Nakao T, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Ide Y, Nakazeki F, Koyama S, Yokode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: American Heart Association Annual Scientific Sessions 2014
  • 発表場所: Chicago
  • 年月日: 2014-11-15 – 2014-11-19
• [学会発表] Self-rating Depression Scale Score as an Inverse and Independent Predictor of Successful Smoking Cessation with a Pharmacological Treatment for Nicotine Addiction (2014)
  • 著者名/発表者名: 3)Wada H, Satoh-Asahara N, Akao M, Abe M, Ono K, Morimoto M, Shimatsu A, Takahashi Y, Hasegawa K.
  • 学会等名: American Heart Association Annual Scientific Sessions 2014
  • 発表場所: Chicago
  • 年月日: 2014-11-15 – 2014-11-19
• [学会発表] Serum HDL-C decreases in microRNA-33b knock-in mice for an intron of sterol regulatory element-binding factor 1 (Srebf1). (2014)
  • 著者名/発表者名: Horie T, Nishino T, Baba O, Kuwabara Y, Nakano T, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: 9th Metabolic Syndrome, Type 2 Diabetes and Atherosclerosis Congress
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-09-12 – 2014-09-14
• [学会発表] MicroRNA-33 deficiency reduces atherosclerotic plaque progression in apoE knockout mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Baba O, Horie T, Ono K, Kuwabara Y, Sowa N, Hasegawa K, Kume N, Yokode M, Kita T, Kimura T.
  • 学会等名: 9th Metabolic Syndrome, Type 2 Diabetes and Atherosclerosis Congress
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-09-12 – 2014-09-14
• [学会発表] MicroRNA-451 is involved in diabetic cardiomyopathy through suppression of the LKB1/AMPK pathway. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kuwabara Y, Horie T, Baba O, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Nakao T, Nishino T, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: 9th Metabolic Syndrome, Type 2 Diabetes and Atherosclerosis Congress
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-09-12 – 2014-09-14
• [学会発表] MicroRNA-33, embedded in Srebf2 intron, regulate fatty acid synthesis through targeting SREBP-1 in vivo. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishino T, Horie T, Baba O, Kuwabara Y, YOkode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: 9th Metabolic Syndrome, Type 2 Diabetes and Atherosclerosis Congress
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-09-12 – 2014-09-14
• [学会発表] 1)microRNA-33b knock-in mice for an intron of sterol regulatory element-binding factor 1 (Srebf1) exhibit reduced HDL-C in vivo. (2014)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘、堀江貴裕、西野共達、北 徹、木村 剛
  • 学会等名: 第5回 Molecular Cardiovascular Conference Ⅱ
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2014-09-05 – 2014-09-06
• [学会発表] 2)飽和脂肪酸により誘導されるmicroRNA-451は、糖尿病性心筋症の増悪因子である。 (2014)
  • 著者名/発表者名: 桑原康秀、堀江貴裕、馬場 理、出原正康、宇佐美俊輔、中尾哲史、西賀雅隆、西野共達、井手裕也、中関典子、小山智史、木村 剛、尾野 亘
  • 学会等名: 第5回 Molecular Cardiovascular Conference Ⅱ
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2014-09-05 – 2014-09-06
• [学会発表] MicroRNA-33 deficiency leads to high fat diet- induced obesity and insulin resistance in vivo. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horie T, Nishino T, Baba O, Kuwabara Y, Nakano T, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: European Society of Cardiology Congress 2014
  • 発表場所: Barcerona
  • 年月日: 2014-08-30 – 2014-09-04
• [学会発表] MicroRNA-33, embedded in Srebf2 intron, regulate fatty acid synthesis through targeting SREBP-1 in vivo. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishino T, Horie T, Baba O, Kuwabara Y, YOkode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: European Society of Cardiology Congress 2014
  • 発表場所: Barcerona
  • 年月日: 2014-08-30 – 2014-09-04
• [学会発表] 第9回五島雄一郎賞受賞講演 ｢High impact of microRNA-33 on atherosclerosis and lipid metabolism｣ (2014)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第46回日本動脈硬化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-07-11 – 2014-07-11
  • 招待講演
• [学会発表] Featured Session：最先端の病態研究 ｢microRNA-33の動脈硬化・脂質制御における役割｣ (2014)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第46回日本動脈硬化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-07-10 – 2014-07-10
  • 招待講演
• [学会発表] MicroRNA-33 encoded by an intron of sterol regulatory element-binding protein-2 (Srebp2) regulates Srebp1 in vivo. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horie T, Nishino T, Baba O, Kuwabara Y, Nakao T, Nishiga M, Usami S, Izuhara M, Sowa N, Yahagi N, Shimano H, Hasegawa K, Kume N Yokode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-04-14 – 2014-04-14
• [学会発表] MicroRNA-33 deficiency reduces atherosclerotic plaque progression in apoE knockout mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Baba O, Horie T, Kuwabara Y, Chujo Y, Watanabe S, Kinoshita M, Horiguchi M, Nakamura T, Chonabayashi K, Hishizawa M, Hasegawa K, Kume N Yokode M, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-04-14 – 2014-04-14
• [学会発表] SREBP-2のイントロンに存在するマイクロRNA-33はSREBP-1の発現を制御する (2014)
  • 著者名/発表者名: 堀江貴裕
  • 学会等名: 第51回日本臨床分子医学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-04-11 – 2014-04-11
• [学会発表] microRNA-451はLKB1-AMPK経路を抑制することで、ラット心筋細胞において細胞障害を、生体においては高脂肪食誘導性心肥大を誘導する (2014)
  • 著者名/発表者名: 桑原康秀
  • 学会等名: 第51回日本臨床分子医学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-04-11 – 2014-04-11
• [学会発表] アポE欠損マウスにおいてマイクロRNA-33欠損は動脈硬化進展を抑制する (2014)
  • 著者名/発表者名: 馬場 理
  • 学会等名: 第51回日本臨床分子医学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-04-11 – 2014-04-11
• [図書] Annual Review 循環器2014 (2014)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 総ページ数: 315
  • 出版者: 中外医学社
• [備考] 京都大学循環器内科 心血管疾患分子機構解明グループ
  • URL: http://kyoto-u-cardio.jp/kisokenkyu/metabolic/