視細胞前駆細胞株をもちいた杆体細胞錐体細胞分化機構の解明

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670740
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 廣津 千恵子 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 研究技術員 (90647174)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: iPS細胞 / 網膜前駆細胞 / 視細胞 / ロドプシン / CRX

研究実績の概要

我々はマウスiPS 細胞にpax6 を導入し視細胞前駆細胞株を作成した。我々はiPS細胞から樹立した網膜前駆細胞を数十株樹立したが、そのうちのmRNAと細胞表面抗原で調べた限り全く差異の無い１０株について詳細に解析した。
樹立した網膜前駆細胞を分化誘導培地で培養前後の視細胞前駆細胞マーカーであるCD73とSDF1受容体であるCXCR4との二重染色を行った。我々の細胞株では発現強度に差は認められるものの、CD73陽性細胞はCXCR4を強く発現する事が分かる。網膜前駆細胞株１０クローンのうち８クローンではSDF1との培養でロドプシン、CRX、RX1、NRLのmRNA発現が濃度依存性に増強する。この作用がCXCR4を介したSDF1によるものである事は特異的な阻害剤AMD3100の添加実験によりCD73蛋白とロドプシン蛋白の発現抑制から示された。興味深い事に、SDF1はCRXのmRNA発現を増強するのみならず、転写因子であるCRXの核内移行を誘導した。luciferase assayを用いた検討からSDF1はロドプシンプロモーターの遺伝子転写を増強するが、そこではCRXの活性化、核内移行を介している事が明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of Retinal Progenitor Cell Sheets which Differentiate into Rhodopsin Positive Photoreceptors from Mouse iPS Cell Derived Retinal Progenitor Cell Clones. (2015)
  • 著者名/発表者名: Suzuki N, Shimizu J, Hirotsu C, Takada E, Arimitsu N, Ueda Y, Fujiwara N, SuzukiT, Takai K.
  • 雑誌名: International Journal of Ophthalmology and Clinical Research 巻: 2 ページ: 1-5
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Induction of neural cells with spinal motoneuron phenotype from human iPS cells and the transplantation to totally transected spinal cords in mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iinuma M, Umehara T, Arimitsu N, Shimizu J, Misawa H, Takai K, Fujiwara N, Fujii A, UedaY, Wakisaka S, Suzuki T, Hirotsu C, Beppu M, Suzuki N.
  • 雑誌名: Inflammation and Regeneration 巻: 35 ページ: 154-163
  • 査読あり