| 研究課題/領域番号 |
25670774
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| 研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
船戸 紀子 東京医科歯科大学, 医歯学研究支援センター, 講師 (10376767)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 口腔上皮 / Tbx1 |
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| 研究概要 |
マウス切歯形成端部では上皮幹細胞が維持されており、エナメル質形成に関与するエナメル芽細胞を供給する。T-box型転写因子をコードするTBX1は、22q11.2欠失症候群の疾患遺伝子の一つであり、マウス切歯形成端部上皮幹細胞や口蓋発生時の口蓋粘膜上皮に発現を認める。本研究では、Tbx1が口腔上皮幹細胞の機能維持に関わるという仮説のもと、切歯や口蓋粘膜の発生および再生におけるTbx1の関与を個体レベルで解明することを目的としている。
まず、上皮幹細胞特異的にTbx1を欠失させたTbx1のLoss-of-function型遺伝子改変マウスの解析を行った。生後1日のTbx1のLoss-of-function型遺伝子改変マウスでは、組織学的にエナメル質の低形成が認められた。また、生後4週、3ヶ月、10ヶ月マウスのドライスカルを作製し、上下顎の切歯、臼歯の数・大きさ・形態を、実体顕微鏡にて観察したところ、3ヶ月までは差が見られなかったものの10ヶ月のTbx1のLoss-of-function型遺伝子改変マウスにおいて、上顎切歯の短小化が認められた。今後、7ヶ月および15ヶ月マウスについても観察をおこない、最適な時期を選んで組織学的検討を加える。
一方、組織特異的にTbx1を強制発現させて表現型を観察するため、新規にTbx1のGain-of-function型遺伝子改変マウスの作製を行った。現在同マウスについて継代飼育中であり、今後、上皮幹細胞特異的にTbx1を強制発現させ、歯および口腔粘膜の表現型について観察する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
Tbx1のLoss-of-function型遺伝子改変マウスの解析については、当初予定していた生後4週、3ヶ月の時点では、野生型と比較して遺伝子改変マウスに顕著な差が認められなかった。そのため、飼育期間をのばして検討中であるため当初の予定より時間を要している。
Tbx1のGain-of-function型遺伝子改変マウスの作製については、計画通りである。
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| 今後の研究の推進方策 |
Tbx1のLoss-of-function型遺伝子改変マウスの解析については、今後、7ヶ月および15ヶ月マウスについても観察をおこない、最適な時期を選んで組織学的検討を加える。
Tbx1のGain-of-function型遺伝子改変マウスの解析については、上皮幹細胞特異的にTbx1を強制発現させ、歯および口腔粘膜の表現型について観察する予定である。他の組織特異的にもTbx1を強制発現させた場合についても観察し、コントロールとする予定である。顕著な表現型が得られた場合、同部位の網羅的遺伝子解析を行う。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
Tbx1のLoss-of-function型遺伝子改変マウスの解析については、当初予定していた生後4週、3ヶ月の時点では、野生型と比較して遺伝子改変マウスに顕著な差が認められず飼育期間をのばしたため。生後10ヶ月の時点では、野生型と遺伝子改変マウスの表現型に差異が認められた。今後、差異が認められる最適な時期について検討を行い、組織にて遺伝子発現解析の検討を行う予定である。
遺伝子改変マウスの組織にて遺伝子発現解析の検討を行うためのプローブ作製用試薬類／キットを購入する。
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