Genetic Analysisによる象牙質劣化における個体差の解明

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670804
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 佐野 英彦 北海道大学, 歯学研究科(研究院), 教授 (90205998)
• 研究分担者: 松田 康裕 北海道医療大学, 歯学部, 講師 (50431317) ; 中沖 靖子 東京医科歯科大学, 歯学部, その他 (50302881) [辞退] ; 川本 千春 北海道大学, 大学病院, 助教 (60301909) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: DNA / SNP / 象牙質

研究実績の概要

本年度では抜去歯からのDNA抽出方法では更にDNAの回収率の改善の効率化を行った。
象牙質の分析を行うこと考慮し、１）象牙質分析試料作成時の象牙質粉、２）根尖を切断した切断片、３）歯髄腔内の歯髄および象牙質粉を試料として、それぞれの試料をEDTAで溶解したのちQiagenのQIAmp DNA Mini kitを用いてDNAの抽出を行った。象牙質粉試料(500mg)から1.0(0.7)ng/μl、根尖試料（300mg）および、歯髄腔内切削試料からは、それぞれ9.8(1.8)ng/μlおよび5.8(1.7)ng/μlのDNAが得られた。
MMP2におけるSNPのrs520640を対象に, HRM分析のためのプライマー設計と増幅領域のSNPの頻度について分析を行った。NCBIのデータベースを元にして138017サンプルのrs520640のアリル比率分析を行った。A/GのアリルでAとGの比率がそれぞれ43.42％と56.58％であった。今回設計したPCRの増幅領域には他にもSNPが存在している。その内の1つがrs646910の比率はAが20.67％,Tは79.33％であるがAAのホモタイプは7.79％であり、ATヘテロを含むT alleleの比率は92.21％であった。その他のいくつかのSNPは確認されているがその割合は1％未満であった。したがって我々の設計したプライマーを用いることによりrs520640のSNPを迅速に識別出来る可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Assessment of the inhibitory effects of fissure sealants on the demineralization of primary teeth using an automatic pH-cycling system. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ushimura, S, Nakamura K, Matsuda Y, Minamikawa H, Abe S, Yawaka Y.
  • 雑誌名: Dental Materials Journal 巻: 35(2) ページ: 316-324
  • DOI: 10.4012/dmj.2015-297.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of microtensile bond strength of self-etching adhesives on normal and caries-affected dentin. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shibata S, Vieira L. C, Baratieri L. N, Fu J, Hoshika S, Matsuda Y, Sano H.
  • 雑誌名: Dental Materials Journal 巻: 35(2) ページ: 166-173
  • DOI: 10.4012/dmj.2014-330.
  • 査読あり
• [雑誌論文] う蝕リスクの遺伝子変異 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松田康裕
  • 雑誌名: 北海道歯学雑誌 巻: 36（1） ページ: 21-23
• [雑誌論文] Fluorine uptake into the human enamel surface from fluoride-containing sealing materials during cariogenic pH cycling. (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsuda Y, Okuyama K, Yamamoto H, Komatsu H, Koka M, Sato T, Hashimoto N, Oki S, Kawamoto C, Sano H.
  • 雑誌名: Nucl Instrum Meth B 巻: 348 ページ: 156-159
  • DOI: 10.1016/j.nimb.2015.01.062
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of caries progression in dentin treated by fluoride-containing materials using an in-air micro-PIGE and micro-PIXE measurement system. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto H, Iwami Y, Yagi K, Hayashi M, Komatsu H, Okuyama K, Matsuda Y, Yasuda K. Evaluation of caries progression in dentin treated by fluoride-containing materials using an in-air micro-PIGE and micro-PIXE measurement system.
  • 雑誌名: Nucl Instrum Meth B 巻: 348 ページ: 152-155
  • DOI: 10.1016/j.nimb.2015.01.068
  • 査読あり
• [雑誌論文] A new technique for analyzing trace element uptake by human enamel (2015)
  • 著者名/発表者名: Funato Y, Matsuda Y, Okuyama K, Yamamoto H, Komatsu H, Sano H
  • 雑誌名: Dental Materials Journal 巻: 34（2） ページ: 240-245
  • DOI: 10.4012/dmj.2014-127
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of different remaining dentin thickness on microtensile bond strength of current adhesive systems (2015)
  • 著者名/発表者名: Ting S, Chowdhury AFM A, Pan F, Fu J, Sun J, Kakuda S, Hoshika S, Matsuda Y, Ikeda T, Nakaoki Y, Abe S, Yoshida Y, Sano H
  • 雑誌名: Dental Materials Journal 巻: 34（2） ページ: 181-188
  • DOI: 0.4012/dmj.2014-130.
  • 査読あり
• [学会発表] Evaluation of dentin-bound fluoride uptaken from fluoride-containing dental materials. (2016)
  • 著者名/発表者名: Okuyama K, Matsuda Y, Yamamoto H, Komada Y, Abe M, Sano H, Tamaki Y
  • 学会等名: 45th Meeting of AADR (American association for dental research)
  • 発表場所: Los Angeles, U.S.A.
  • 年月日: 2016-03-16 – 2016-03-19
  • 国際学会
• [学会発表] Caries prevention after surface reaction-type prereacted glass ionomer filler-containing coating resin removal from root surfaces. (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyata Saori, Tanaka Saori, Matsuda Yasuhiro, Hashimoto Naoki, Sano Hidehiko and Kawakami Masamitsu
  • 学会等名: Nano Korea 2015 Symposium
  • 発表場所: Seul, Korea
  • 年月日: 2015-07-01 – 2015-07-03
  • 国際学会
• [学会発表] Quantitative analysis of fluorine uptake in pre-demineralized enamel from filling materials (2015)
  • 著者名/発表者名: Yasuhiro, Hashimoto Naoki, Okuyama Katsushi, Koka Masashi, Sato Takahiro, Nakamura Koichi, Abe Shigeaki and Sano Hidehiko
  • 学会等名: Nano Korea 2015 Symposium
  • 発表場所: Seul, Korea
  • 年月日: 2015-07-01 – 2015-07-03
  • 国際学会