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2015 年度 実績報告書

自律的な微小管輸送によるパッシブ型分子分離システム

研究課題

研究課題/領域番号 25709018
研究機関京都大学

研究代表者

横川 隆司  京都大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (10411216)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
キーワードナノマシン / ナノバイオ / マイクロ・ナノデバイス / 生物物理 / 分子モーター / 分子操作 / MicroTAS / 電気泳動
研究実績の概要

平成27年度前期において,PDMS-ガラスの微小流体デバイス内において微小管の表面電荷密度を反映して分離できることを実証した.また,ヌクレオチドの違いにより微小管の剛性を変化させることによっても,デバイス内での分離が可能であることを試行実験において確認した.この際の分離効率は7~8割程度であった.このため,表面電荷密度と剛性をともに改変することで,より高効率な分子分離が可能になると考え,微小管の剛性改変技術の検討と同時に剛性測定方法のアルゴリズム開発をおこなった.
微小管の剛性改変技術では,ヌクレオチドの違いに加え,微小管重合速度の違い,微小管結合タンパク質の違い,およびこれらの複数の組み合わせによって7種類の微小管を準備してその測定をおこなった.これまでにも,微小管の合成に関する報告は多いが,その値は2桁もばらつき一定の見解が得られていない.本研究によって,重合速度が遅いほど,また微小管結合タンパク質が多いほど剛性が高くなることが示された.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成27年度においては,当初予定していた課題3までが順調に推進できその成果が得られている.微小流体デバイスの開発はプロトタイプであるが,電気泳動移動度および剛性の違いによって微小管を分離できることがデバイス内で実証できた.最終年度である平成28年度には,これら2つの変数を制御することで効率的な分子分離システムを提案する準備が整っておりおおむね順調であると判断した.

今後の研究の推進方策

微小管の剛性についての知見は平成27年度に新たに得られたものであり,今後は剛性の差を最も効果的に得られる条件を検討する.さらに,平成26年度に確立した表面電荷密度の改変技術を併用することで,より曲がりにくい,あるいはより曲がりやすい微小管を準備する.最終的には,これらの微小管に適した微小流体デバイスの最適化をおこない,効率的な分子分離システムの実証を目指す.
また,微小管の剛性に対しては,生物物理学的な視点からその意義を先行研究と比較して,一定の解釈を得ることを目指す.将来的には,in vivoでの微小管剛性が細胞内輸送にどのように影響しているかを検証する.

  • 研究成果

    (13件)

すべて 2016 2015 その他

すべて 国際共同研究 (2件) 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 謝辞記載あり 1件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (7件) (うち国際学会 7件、 招待講演 3件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] University of Michigan/University of Massachusetts, Amherst/University of Wisconsin, La Crosse(米国)

    • 国名
      米国
    • 外国機関名
      University of Michigan/University of Massachusetts, Amherst/University of Wisconsin, La Crosse
  • [国際共同研究]

    • 他の国数
      1
  • [雑誌論文] Velocity Control of Microtubules with High Spatial Resolution on an Au-coated Surface with an SU-8 Thermal Isolation Layer2016

    • 著者名/発表者名
      T. Nakahara, H. Shintaku, H. Kotera, R. Yokokawa
    • 雑誌名

      電気学会論文誌E(センサ・マイクロマシン部門誌)

      巻: 136 ページ: 77-82

    • DOI

      10.1541/ieejsmas.136.77

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Synergistic effect of ATP for RuvA–RuvB–Holliday junction DNA complex formation2015

    • 著者名/発表者名
      T. Iwasa, Y.-W. Han, R. Hiramatsu, H. Yokota, K. Nakao, R. Yokokawa, T. Ono, Y. Harada
    • 雑誌名

      Sci. Rep.

      巻: 5 ページ: 18177

    • DOI

      10.1038/srep18177

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Multiple independent autonomous hydraulic oscillators driven by a common gravity head2015

    • 著者名/発表者名
      S.-J. Kim, R. Yokokawa, S. C. Lesher-Perez, S. Takayama
    • 雑誌名

      Nat. Commun.

      巻: 6 ページ: 7301

    • DOI

      10.1038/ncomms8301

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Controlling Gliding Trajectories of Microtubules by Altering Microtubule Flexural Rigidity2016

    • 著者名/発表者名
      N. Isozaki, S. Erickson, H. Shintaku, H. Kotera, T. L. Hawkins, J. L. Ross, R. Yokokawa
    • 学会等名
      Biophysical Society 60th Annual Meeting
    • 発表場所
      Los Angeles, USA
    • 年月日
      2016-02-27 – 2016-03-02
    • 国際学会
  • [学会発表] Dynamic Microfluidic Channels for Active Nanotransport Driven by Kinesin Motor Proteins2015

    • 著者名/発表者名
      R. Yokokawa
    • 学会等名
      9th EAI International Conference on Bio-inspired Information and Communications Technologies, Special track on Bio-inspired Self-propelling Systems (BSS)
    • 発表場所
      New York, USA
    • 年月日
      2015-12-03 – 2015-12-05
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Micro/Nano Fabrications for Biophysical Studies of Motor Proteins2015

    • 著者名/発表者名
      R. Yokokawa
    • 学会等名
      28th International Microprocesses and Nanotechnology Conference (MNC 2015)
    • 発表場所
      富山
    • 年月日
      2015-11-10 – 2015-11-13
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] On-chip detection of tau mutants and 3R:4R tau ratio based on tau’s binding affinity to taxol stabilized microtubules2015

    • 著者名/発表者名
      S. Subramaniyan Parimalam, M. C. Tarhan, S. L. Karsten, H. Fujita, H. Shintaku, H. Kotera, R. Yokokawa
    • 学会等名
      The 45th Annual Meeting of the Society for Neuroscience (SfN)
    • 発表場所
      Chicago, USA
    • 年月日
      2015-10-17 – 2015-10-21
    • 国際学会
  • [学会発表] Integration of Micro/Nano Fabrications and Biophysics2015

    • 著者名/発表者名
      R. Yokokawa
    • 学会等名
      Annual Meeting of The Japan Society of Mechanical Engineers
    • 発表場所
      札幌
    • 年月日
      2015-09-13 – 2015-09-16
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Dynamic formation of a microchannel array enables kinesin-driven microtubule transport between separate compartments on a chip2015

    • 著者名/発表者名
      K. Fujimoto, M. Nagai, H. Shintaku, H. Kotera, R. Yokokawa
    • 学会等名
      The 18th International Conference on Solid-State Sensors, Actuators and Microsystems (Transducers 2015)
    • 発表場所
      Anchorage, USA
    • 年月日
      2015-06-21 – 2015-06-25
    • 国際学会
  • [学会発表] Directional Control of Microtubules by Designing Their Biophysical Properties2015

    • 著者名/発表者名
      N. Isozaki, H. Shintaku, H. Kotera, E. Meyhfer, R. Yokokawa
    • 学会等名
      2015 MRS Spring Meeting & Exhibit
    • 発表場所
      San Francisco, USA
    • 年月日
      2015-04-06 – 2015-04-10
    • 国際学会
  • [備考] 横川 隆司の個人ページ

    • URL

      http://www.ksys.me.kyoto-u.ac.jp/ry/

URL: 

公開日: 2017-01-06   更新日: 2022-01-27  

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