iPS細胞を応用した表皮水疱症の根本的治療法の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25713041
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 藤田 靖幸 北海道大学, 大学病院, 助教 (80374437)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 表皮水疱症

研究実績の概要

同系マウス由来の正常遺伝子を有するiPS細胞(GFP＋TgマウスおよびCD45.1発現マウス)に対し、Lhx2遺伝子導入による血球系分化誘導を行った。血球系前駆細胞への分化効率をフローサイトメトリーで検討したところ、15-30％であった。これらの細胞はin vitroで各血球系への分化能を確認した。こうして得られたiPS細胞由来造血前駆細胞を、17型コラーゲン欠損表皮水疱症マウス(n=3)に移植したところ、全例が2週間以内に死亡した。また、17型コラーゲンヒト化マウス(マウス17型コラーゲンは欠損しているものの、ヒト17型コラーゲンを発現しているマウス)を移植対象とし、サポーター細胞として17型コラーゲン欠損マウス骨髄細胞と混合して移植した。移植後4週間後の時点での末梢血キメラ形成率は12.2 ± 5.26 % (n=10)であった．移植後200日の時点で生存率は約50％となり、未治療群と比較して生存予後の改善傾向がみられた。GFP+Tgマウス由来iPS細胞から誘導した造血幹細胞を移植した群においては、フローサイトメトリーでiPS細胞由来末梢血細胞の割合を解析したところ、10.3±4.8％にとどまった。移植後の上皮化皮膚においては、RT-PCRにて2匹にわずかなマウス17型コラーゲンmRNAの発現が確認されたが、マウス17型コラーゲンの発現を、免疫蛍光抗体法および電子顕微鏡解析で確認されなかった。
iPS細胞由来幹細胞移植郡と、従来の骨髄移植郡で出現するドナー由来表皮角化細胞の分子学的差違を検討するため、各々の細胞を分離抽出し、マイクロアレー法で解析したところ、iPS細胞由来角化細胞でCXCL9などの発現上昇が確認された。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] MMP13 can be a useful differentiating marker between squamous cell carcinoma and benign hyperkeratotic lesions in recessive dystrophic epidermolysis bullosa. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hata H, Abe R, Suto A, Homma E, Fujita Y, Aoyagi S, Shimizu H.
  • 雑誌名: British Journal of Dermatology 巻: 172 ページ: 769-773
  • DOI: doi: 10.1111/bjd.13302.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Development of bullous pemphigoid during treatment of psoriatic onycho-pachydermo periostitis with ustekinumab. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakayama C, Fujita Y, Watanabe M, Shimizu H
  • 雑誌名: Journal of Dermatology 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Annexin A1- FPR1 Interaction Contributes to Necroptosis of Keratinocytes in Severe Cutaneous Adverse Drug Reactions. (2014)
  • 著者名/発表者名: Saito N, Qiao H, Yanagi T, Shinkuma S, Nishimura K, Suto A, Fujita Y, Suzuki S, Nomura T, Nakamura H, Nagao K, Obuse C, Shimizu H, Abe R.
  • 雑誌名: Science Translational Medicine 巻: 6 ページ: 245ra295
  • DOI: doi: 10.1126/scitranslmed.3008227.
  • 査読あり
• [学会発表] GVHD-like manifestation in Thymoma: Thymoma-associated multiorgan autoimmunity. (2015)
  • 著者名/発表者名: Muramatsu K, Fujita Y, Inokuma D, Tsukinaga I, Ito K, Nishiura Y, Shimizu H
  • 学会等名: The 23rd World Congress of Dermatology
  • 発表場所: Vancouver Convention Centre (Vancouver, Canada)
  • 年月日: 2015-06-08 – 2015-06-13
• [学会発表] RNA recognition motif of LEMD3 as a key player in the pathogenesis of Buschke-Ollendorff syndrome. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takashima S, Fujita Y, Suzuki S, Saito N, Shinkuma S, Nomura T, Shimizu H
  • 学会等名: The 71st Annual Meeting of the Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: Hilton Atlanta Hotel (Atlanta, USA)
  • 年月日: 2015-05-06 – 2015-05-09
• [学会発表] Epidermolysis bullosa in Japan: from bench to bedside. (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujita Y
  • 学会等名: The 37th Kung-Sun Oh Memorial Lecture
  • 発表場所: Yonsei University (Seoul, Korea)
  • 年月日: 2014-08-30 – 2014-08-30
  • 招待講演