PEDF受容体のin vitroによる機能評価を下記の内容でおこなった。 1) 血管平滑筋細胞を増殖因子により刺激した際の PEDF 受 容体の発現量の変化をウエスタンブロット法、real-time PCR 法により検討する。 2) 血管平滑筋細胞の増殖、遊走を PEDF 受容体の過剰発現ま たは siRNA によるノックダウンにより、抑制または促進 しうるか否かをヒト平滑筋培養細胞の増殖(3H-ラベルチ ミジン取り込み)、遊走(ボイデンチャンバー法)の評価に より検討する。 PEDF 受容体の過剰発現またはノックダウンが細胞増殖シグナル(p21、p27、p53)、細胞周期(cyclin D1、cyclin E)をどのように抑制するのかを real-time PCR 法、ウェスタンブロ ット法を用いて検討する。
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