• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2013 年度 実施状況報告書

小脳・脳幹部低形成を伴う発達遅滞を呈する疾患群の包括的病態解明

研究課題

研究課題/領域番号 25830135
研究種目

若手研究(B)

研究機関東京医科歯科大学

研究代表者

林 深  東京医科歯科大学, 硬組織疾患ゲノムセンター, 特任講師 (50596244)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
キーワード疾患関連遺伝子 / 先天異常疾患
研究概要

申請者らは、種々のゲノムアレイを用いた先天異常疾患スクリーニングから、Xp11.4に座位するCASK遺伝子の女性におけるハプロ不全が小頭症・小脳脳幹部低形成を伴う精神遅滞 (mental retardation and microcephaly with pontine and cerebellar hypoplasia; MICPCH)の原因となることを見いだしたことを契機として、MICPCHの疾患原因を包括的に明らかにすることを目標とする研究を行ってきた。
平成25年度末までにMICPCHの典型例40例、非典型例3例を収集してCASK遺伝子の解析を行い、30/40例 (70%)に疾患原因につながるゲノム異常を検出してきた。一方、この解析で陰性であった症例と非典型例の合計13例に対しては、新規疾患原因遺伝子を探索するために本人と両親のトリオを対象として、次世代シークエンサーを用いたスクリーニングを行い、その他の疾患原因を探索している。具体的には、1)CASKの全長ならびに既知の頭症・小脳脳幹部低形成の疾患原因遺伝子19種類をターゲットとしたターゲットリシークエンス、2)全エクソンシークエンス を計画し、現時点では1)では有意な変異は見いだされず、漸次2)による解析を新学術領域「ゲノム支援」のもと施行中である。
また、6q21微小欠失を有するMICPCH症例より、ヒストン脱アセチル酵素をコードするHDAC2がやはり疾患原因となる可能性を検討しており、神経由来のセルラインに対するsiRNAによる発現抑制系を用いて、HDAC2と隣接するMARCKSのハプロ不全が正常な中枢神経発達を阻害する可能性をin vitroにて検証している。
なお、MICPCH症例並びに両親サンプルの収集は継続して行っており、疾患原因を明らかにすることで原因不明症例の診断に寄与するだけではなく、新規症候群としての知見を蓄積し、予後予測や療育方針の決定に寄与し、患者会の形成により患児・両親間の交流を図るなど、臨床・研究の両面における成果が得られている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

申請者らは本研究期間内に以下の点を明らかにすることを目標として設定した。それぞれ現時点での進捗を併せて記したとおり、各目標1~3概ね順調に進捗していると判断する。
1.【目標】CASK異常陰性のMICPCH症例を対象とした新規疾患原因遺伝子の特定。 【進捗】これまでに収集解析してきたMICPCHの典型例40例、非典型例3例のうち、CASK変異陰性例である13例を対象として、次世代シークエンサーを用いた下記のスクリーニングを施行した。1)CASKの全領域と既知の小頭症・小脳脳幹部低形成の疾患原因遺伝子19種類をターゲットとしたターゲットリシークエンス。現在のところ疾患原因につながる変異は見いだされていない。 2)1)の陰性症例に対する、患児・両親のトリオを対象とした全エクソンシークエンス。新学術領域「ゲノム支援」の支援の下で施行し、現在データ解析中である。
2.【目標】MICPCHの疾患原因遺伝子候補であるHDAC2の機能解析。 【進捗】神経由来のセルラインを用いて、HDAC2ならびに隣接するMARCKSのハプロ不全が正常な中枢神経発達を阻害する可能性をin vitroにて検証している。本件ではsiRNAによる安定した発現抑制系が構築できており、現在では神経軸索伸張の評価を行っている。
3.【目標】新規症例の収集とgenotype/phenotype情報の集積。 【進捗】平成25年度には新規6症例を収集解析した。また、両親サンプルの収集藻へ移行して行い、累積で13症例の両親サンプルを併せて解析している。

今後の研究の推進方策

1.これまでに収集解析してきたMICPCHの典型例40例、非典型例3例の解析を終了し、いずれに置いても疾患原因を明らかにする。次世代シークエンサーを用いた解析により新規疾患原因遺伝子候補が見いだされた場合は、神経細胞由来セルラインを用いた発現抑制系における表現型の評価、モデルマウスを用いた胎生期の発現パターン、ノックアウトマウスにおける表現型の評価などを通じ、当該遺伝子とMICPCHとの関連を明らかにする。また、MICPCHの未診断例におけるスクリーニングを行う。
2.HDAC2ならびに隣接するMARCKSのハプロ不全の機能評価をin vitroにおいて終了し、有意な結果が得られた場合にはノックアウトマウスの作製を行い、本遺伝子とMICPCHとの関連を明らかにする。
3.新規症例ならびに両親サンプルの収集は継続して行い、genotype/phenotype情報を蓄積するとともに、予後予測や療育方針などを通じて臨床に還元する。
4.上記の成果を論文化する。また、新規疾患概念であることに鑑み、公開可能な情報をインターネット上で公開し、臨床医や患者への便益を図る。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2013

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Genetic Variants in C5 and Poor Response to Eculizumab in PNH.2013

    • 著者名/発表者名
      Nishimura J, Yamamoto M, Hayashi S, Ohyashiki K, Ando K, Brodsky AL, Noji H, Kitamura K, Eto T, Takahashi T, Masuko M, Matsumoto T, Wano Y, Shichishima T, Shibayama H, Hase M, Li L, Johnson K, Lazarowski A, Tamburini P, Inazawa J, Kinoshita T, Kanakura Y.
    • 雑誌名

      N Eng J Med.

      巻: 370 ページ: 632-639

    • DOI

      10.1056/NEJMoa1311084

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Xq28重複症候群2013

    • 著者名/発表者名
      林深,稲澤讓治
    • 雑誌名

      小児科臨床

      巻: 66 ページ: 1290-1296

  • [学会発表] 小脳脳幹部低形成 (MICPCH)の原因となる多彩な病態の探索.2013

    • 著者名/発表者名
      林深,岡本伸彦,高梨潤一,稲澤譲治
    • 学会等名
      日本人類遺伝学会58回大会
    • 発表場所
      仙台
    • 年月日
      20131123-20131123
  • [学会発表] Investigation of CASK gene aberrations in 38 patients with severe intellectual disability, microcephaly and disproportionate pontine and cerebellar hypoplasia.2013

    • 著者名/発表者名
      Hayashi S, Nobuhiko O, Takanashi J, Inazawa J.
    • 学会等名
      The American Society of Human Genetics 63rd annual meeting
    • 発表場所
      Boston
    • 年月日
      20131024-20131024

URL: 

公開日: 2015-05-28  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi